| المجلد الثالث - العدد 1 - رمضان 1424 - تشرين الأول 2003 |
| |
الغلوبولين المناعي Aالإفرازي في اللعاب sIgA
وسيلة تشخيصية جديدة وغير باضعة للداء البطني (الزلاقي) |
Secretary Immunoglobulin A in Saliva (sIgA),
New and Noninvasive Diagnostic Method for Celiac Disease |
| د. كنان الخوري*؛ أ.د. إميل شاهين*؛ أ.د. عبدو جرجس**؛ أ.د. محي الدين جمعة* و د. الياس إيليا***
|
| Alkhoury K., Chahine E., Jumaa M., Jurjus A. and Elia E. |
| * جامعة دمشق؛ ** الجامعة الأميركية, بيروت ؛ *** مختبرات (Diagnos-Techs, Inc. clinical
& Research Laboratory - USA), الولايات المتحدة الأمريكية, ولاية سياتل Seattle.
|
| الملخص Abstract |
| تم قياس مستويات الـ sIgA في اللعاب بطريقة الـ ELISA والـ IgA الكلي في المصل بطريقة المقايسة بالعكر لمجموعة مرضى مصابين بالداء البطني (الزلاقي) (34 مريضاً), ومجموعة أشخاص أسوياء ظاهرياً (120 شخصاً), وقمنا بتحديد المجال المرجعي للـ sIgA فكان [58 – 306] مغ/ل, كذلك قمنا بتحديد المجال المرجعي للـ IgA فكان [89 – 512] مغ/دل. وعند دراسة مستويات الـ sIgA في اللعاب عند المرضى بالداء (الزلاقي) وذلك بعد تقسيمهم إلى مجموعتين حسب تقيدهم بالحمية الخالية من الغلوتين. أظهر هؤلاء المرضى اضطراباً في مستويات الـ sIgA في اللعاب, وكذلك الأمر عند دراسة مستويات الـ IgA الكلي في مصل مرضى المجموعتين تبين حدوث اضطراب في مستويات الـ IgA الكلي حسب تقيد المرضى بالحمية الخالية من الغلوتين. |
| The levels of sIgA in saliva was detected by ELISA, and the levels of total IgA in serum was also detected by Nephlometric assay for a group of celiac patients (No: 34) and for a control group (No: 120), we defined the reference range of salivary sIgA and it was[306 – 58] mg / L, also we defined the reference range of total IgA in serum and it was [512 – 89] mg / dL. After dividing the celiac patients into two groups: patients who are on gluten free diet, and patients who aren't on gluten free diet, those patients showed abnormal levels of sIgA in saliva, and the same matter when we studied total IgA in serum, the patient showed abnormal levels of it, and those abnormalities were dependent on taking the glutene free diet or not. |
| مقدمة Introduction |
| تزايدت خلال العقدين الماضيين الأبحاث التي قدمت العديد من الطرق لاستخدام عينات من اللعاب لتشخيص الأمراض وأدت إلى عزل مواد فعالة حيوياً من التجويف الفموي, ويتابع العلماء التركيز على دور اللعاب في صحة الفم, ومحاولة استكشاف طرق علاج نقص اللعاب. ومن بين سوائل الجسم فاللعاب هو الأسهل من حيث طريقة الجمع, وعلى الرغم من أن معظم اللعاب ماء ووظيفته الرئيسية هي التزليق, والبدء بعملية الهضم, فإنه يحتوي على مئات من المركبات الأخرى التي تشكل آليات دفاع محكمة عن ميناء الأسنان والتجويف الفموي. تنتج الغدد اللعابية تقريباً 1 لتر يومياً من اللعاب مصلي ومخاطي القوام والذي يحتوي على إنزيمات, معادن, بروتينات مصلية, خلايا دموية, جراثيم, إفرازات الطريق التنفسي العلوي.... ومن أول الاختبارات التي استخدمت اللعاب في التشخيص هو اختبار التحري عن الـ HIV, ومن ثم تنوع استخدام اللعاب كسائل تشخيصي في الطب الشرعي مثلاً, وفي تحري الخصوبة وهرمونات الغدد الصم مثل البروجسترون والإيستراديول... , كما يمكن باستخدام اللعاب تحري اضطرابات البنكرياس المزمنة, بالإضافة للكثير من الأدوية التي يمكن تحديد مستوياتها في اللعاب مثل الديجوكسين والجنتاميسين, ويمكن أيضاً استخدام اللعاب في تحديد مستويات الغلوبولينات المناعية بشكل عام, لفيروس الحلأ البسيط مثلاً, ولأضداد الغليادين والغلوبولين المناعي A الإفرازي لدى مرضى الداء الزلاقي. ويلعب هذا الأخير [(sIgA) secretory -immunoglobulin A] وتحت صفوفه (تنوعاته) دوراً هاماً في حماية المواقع المخاطية مثل مخاطية الأمعاء.
|
| الغلوبولين المناعي A الإفرازي sIgA |
| على عكس الـ IgA في المصل، فمن المعروف أن الـ IgA الإفرازي يلعب دوراً هاماً في نظام المناعة. حيث أن الـ sIgA هو ثاني غلوبولين مناعي يقدم للوليد بعد الـ IgG، مما يعزز المناعة المنفعلة (8). ويحصل الوليد على الـ sIgA من اللبأ (colostrum)، وهي المادة التي تسبق إفراز لبن الأم, حيث يتلقى الوليد من خلال الإرضاع الوالدي 0.5 – 1 غ من الـ sIgA يومياً, وهو الضد السائد في حليب الأم (2). ومن المعروف أنه يتم إفراز الـ IgA في اللعاب في الطفولة المبكرة لكن غير معروف متى يصل إلى مستواه عند البالغين, وعلاوة على ذلك فالعديد من العوامل الإضافية مثل الإرضاع الوالدي, العمر, إدخال الغلوتين إلى الغذاء, الالتهابات الهضمية, تؤثر على الاستجابة المناعية الخلطية عند الأطفال بمختلف الأعمار (3), وأكد على ذلك Nagao A.T., et al. حيث وجد أن العوامل المحيطية تؤثر على تكون الـ sIgA عند الفرد (6). لكن بعد الولادة تبدأ الخلايا المناعية المولدة للـ IgA بالسيطرة, ولا يمكن أن نجد IgA في لعاب الوليد عند الولادة, بل تبدأ الـ IgA والـ IgM بعد ذلك بفترة قصيرة كاستجابة للمستضدات المحيطية, ويصبح الـ IgA هو الغلوبولين المناعي السائد في اللعاب وذلك على شكل sIgA (7).
لا يمتص الـ sIgA إلى الدوران بل يبقى في المعي ليبدأ بحماية السطوح المخاطية. وهكذا فإن هذا الـ sIgA نوعي للمستضدات الجرثومية والفيروسات المعوية. وتلعب هذه الأضداد دوراً في الحماية من الإصابة بالكوليرا, ETEC, العطيفة (Campylobacter), الشيغيلا, والجيارديا (2).
يلعب الـ IgA الإفرازي دوراً أساسياً في دفاع الجسم على السطوح الظهارية. فقد وجد أنه الغلوبولين المناعي الأساسي في السبيل الأنفي البلعومي، التناسلي البولي والمعدي المعوي، وفي مفرزات الغدد اللبنية، والدموع والعرق. وقد درس تأثيره الوقائي بشكل جيد (8), ويؤكد Miletic I.D., et al. على أنه الغلوبولين السائد على السطوح المخاطية حيث يعمل كخط الدفاع الأول ضد الأخماج الجرثومية (5), وبمعنى آخر فالوظيفة الرئيسية للـ sIgA هي ممارسة الاستبعاد (الحذف) المناعي (immune exclusion) وذلك من خلال التعاون مع العوامل الدفاعية غير النوعية (المناعة الخلقية), حيث تنقص من نفوذية المستضدات الذوابة وتثبط استعمار الظهارات من قبل الجراثيم والفيروسات (1). فقد وجد أن بعض مرضى عوز الـ IgA يعانون من ارتفاع نسبة حدوث سوء امتصاص، إسهال، كما يعانون من تكرار الإصابة بأخماج الجهاز التنفسي. وهذا يبين تفوق أهمية دور الـ sIgA على دور IgA المصل (8).
قمنا في دراستنا بتحديد مستويات تركيز الـ sIgA الكلي عند مرضى الداء الزلاقي ومقارنتها مع المستويات التي تم تحديدها لمجموعة الأشخاص الأصحاء ظاهرياً. كما قمنا بمعايرة الـ IgA الكلي في المصل. وربطنا النتائج التي حصلنا عليها بنتائج الخزعات المعوية.
|
المواد والطرق Materials and Methods
مجموعة الدراسة Study group |
| بلغ عدد الحالات المدروسة 154 حالة من كلا الجنسين, تراوحت أعمارهم بين 2- 66 سنة, وتم تقسيمهم إلى مجموعتين رئيسيتين, مجموعة مراقبة Control(120 شخصاً), ومجموعة مرضى Patients (34 مريضاً). |
| 1- مجموعة المراقبة Control group |
| تتألف هذه المجموعة من 120 شخصاً أسوياء ظاهرياً, وعند جمع العينات من هؤلاء الأشخاص كنا نراعي توفر الصفات التالية لديهم:
* تتراوح أعمارهم بين 6 – 66 سنة.
* غير مصابين بأمراض معوية وغير مصابين بالداء السكري.
* غير مصابين بأمراض التهابية شديدة عند سحب العينات.
* لا يتناولون الكورتيكوستيرويدات الستيروئيدات القشرية (Corticosteroids).
* تم جمعهم من معظم المناطق السورية لتحقيق التجانس على مستوى القطر. |
| 2- مجموعة المرضى بالداء البطني (الزلاقي)
Celiac Patients |
| تتألف هذه المجموعة من 34 مريضاً مثبتة لديهم الإصابة بالداء الزلاقي عن طريق إجراء الخزعة المعوية Intestinal Biopsy لكن تختلف حالتهم السريرية حسب تقيدهم بالحمية الخالية من الغلوتين: مرضى محميين: 14 مريضاً, مرضى غير محميين: 20 مريضاً, وقد أخذت هذه العينات من المرضى المراجعين للعيادة الهضمية والمقيمين في الشعبة الهضمية في مستشفى الأطفال, ومستشفى الأسد الجامعي, ومستشفى المواساة, وبعض المخابر الطبية الخاصة. |
| الطرق المستخدمة في الدراسة: |
استخدمنا في هذه الدراسة نوعين من العتائد (الطواقم) المختلفة:
* طاقم لمعايرة الـ sIgA بطريقة الـ ELISA خاص بمختبرات (Diagnos-Techs, Inc. clinical & Research Laboratory - USA) في الولايات المتحدة الأمريكية, ولاية سياتل Seattle.
* طاقم لمعايرة الغلوبولين المناعي A الكلي في المصل بطريقة مقياس العكر المناعي (Immuno Nephlometric Assay), لشركة (ROCHE) الفرنسية. |
| النتائج والمناقشة Results and Discussion |
| قمنا بتحديد المجال السوي للـ sIgA في مجموعة الأسوياء، ويظهر الشكل 1 توزع القيم وهو يتبع التوزع الطبيعي, وبالتالي كان المجال المرجعي المحسوب 58 – 306 في حين كان المجال المرجعي المرفق بالطريقة 200 – 600, والقيم مقدرة بالـ مغ/ل.
كما قمنا بتحديد المجال السوي للـ IgA الكلي في المصل, وكما نلاحظ من الشكل 2 فالمنحنى لا يتبع التوزع الطبيعي وبالتالي قمنا بحساب لوغاريتم القيم وبالنهاية كان المجال المرجعي المحسوب 89 – 512 في حين كان المجال المرجعي للطريقة 70 – 400, والقيم مقدرة بالـ مغ/دل. |
| الـ sIgA و الداء الزلاقي: |
قمنا بدراسة تغير مستويات تراكيز الغلوبولين المناعي A الإفرازي في اللعاب عند مجموعة المرضى المشخص عندهم الداء البطني (الزلاقي) (34 مريضاً) بمقارنتها مع مستوياته عند مجموعة المراقبة (36 شخصاً), فقمنا في بالبداية بدراسة ارتفاع وانخفاض قيم الـ sIgA فكانت النتائج كالتالي:
كان الـ sIgA
مرتفعاً عند 6 مرضى, كما كان منخفضاً عند 6 مرضى أيضاً وعند دراسة هذه النتائج إحصائياً لم تكن ذات قيمة, وبالتالي لم توجد علاقة بين ارتفاع الـ sIgA لوحده مع الداء الزلاقي, وكذلك الأمر بالنسبة لانخفاضه. فقمنا بدراسة العلاقة بين اضطراب الـ sIgA (ارتفاعه وانخفاضه) والإصابة بالداء الزلاقي. فكانت النتائج مبينة في الجدول 1 والشكل 3.
باستخدام قانون كاي مربع تبين لدينا أن قيم الغلوبولين المناعي A الإفرازي تتأثر عند الإصابة بالداء الزلاقي, وبالتالي, يحدث لدى هؤلاء المرضى خلل على مستوى الجهاز المناعي المخاطي يؤدي إلى اضطراب في مستويات الـsIgA في اللعاب.
وهذا لا يتوافق مع نتائج دراسة (Gibney & Brady, 1991) والتي تقول بعدم تأثر تراكيز الـ sIgA عند مرضى الداء البطني (الزلاقي). في حين توافقت نتائجنا مع نتائج دراسة (Lenander L. M., et al., 2000)(4).
وجد (Wallington et al., 1972) أن تراكيز الـ sIgA ترتفع في اللعاب عند مرضى الداء البطني (الزلاقي), في حين وجد (Kelly et al., 1991) و (Warner RH, et al., 1999) (8) أن هذه التراكيز
تنخفض في لعاب مرضى الداء البطني (الزلاقي). كما وجد (Lavo B, et al., 1992) ازدياد تراكيز الـ sIgA في الصائم عند مرضى الداء البطني الزلاقي. |
الشكل 1: توزع قيم الـ sIgA عند مجموعة الأسوياء. |
الشكل 2: توزع قيم الـ IgA عند مجموعة الأسوياء. |
|
الجدول 1: توزع تراكيز الـ sIgA لدى المرضى والمراقبة.
| غير طبيعي |
طبيعي |
sIgA الحالة |
| 12: 35% |
22: 65 % |
المرضى |
| 3: 8 % |
33: 92 % |
المراقبة |
|
الشكل 3: توزع تراكيز الـ sIgA لدى المرضى والمراقبة. |
| الـ IgA والداء البطني (الزلاقي): |
| لقد تم دراسة تغير مستويات تراكيز الغلوبولين المناعي A الكلي في المصل عند مجموعة المرضى المشخص عندهم الداء البطني (الزلاقي) (34 مريضاً) وبمقارنتها مع مستوياته عند مجموعة المراقبة (36 شخصاً)، والنتائج مبينة في الجدول 2 والشكل 4.
باستخدام قانون كاي مربع وجدنا أنه تتأثر
قيم الغلوبولين المناعي A الكلي في المصل
عند الإصابة بالداء البطني (الزلاقي), وبالتالي, يحدث لدى هؤلاء المرضى خلل على مستوى الجهاز المناعي العام يؤدي إلى اضطراب في مستويات الـ IgA الكلي في المصل.
لم تتوافق نتائج دراستنا مع نتائج (Hobs & Hepner, 1968) الذي لم يجد تغيراً في تراكيز الـ IgA الكلي عند مرضى الداء البطني (الزلاقي).
في حين توافقت نتائجنا مع نتائج دراسات كل من (Squith, et al., 1969) و (Baklein, 1977) و (Soppi, et al., 1987), والتي تقول باضطراب قيم الـ IgA عند مرضى الداء البطني الزلاقي (8).
|
الجدول 2: توزع تراكيز الـ IgA لدى المرضى والمراقبة.
| غير طبيعي |
طبيعي |
sIgA الحالة |
| 8 : 24% |
26 : 76 % |
المرضى |
| 2 : 6 % |
34 : 94 % |
المراقبة |
|
الشكل 4: توزع تراكيز الـ IgA لدى المرضى والمراقبة. |
| الاستنتاج Conclusion |
| لقد حصلنا من خلال دراستنا على المجال السوي للغلوبولين المناعي A الإفرازي (sIgA) في سوريا [58 – 306] في حين كان المجال المرجعي المرفق بالطريقة [200 – 600], والقيم مقدرة بالـ مغ/ ل. كما حصلنا على المجال السوي للغلوبولين المناعي A الكلي في المصل (IgA) في سوريا [89 – 512] في حين كان المجال المرجعي للطريقة [70 – 400], والقيم مقدرة بالـ مغ/دل. وعند دراسة العلاقة بين الـ sIgA والداء البطني (الزلاقي) تبين لدينا أن الـ sIgA يضطرب عند مرضى الداء البطني (الزلاقي) وتتغير قيمه حسب إتباع المريض لحمية خالية من الغلوتين, وبالتالي يحدث اضطراب على مستوى الجهاز المناعي المخاطي عند مرضى الداء البطني (الزلاقي), وكذلك الأمر بالنسبة للـ IgA الذي يضطرب أيضاً عند مرضى الداء البطني (الزلاقي), وبالتالي يحدث لدى هؤلاء المرضى اضطراب على مستوى الجهاز المناعي العام. |
| المراجع References |
1-Brandtzaeg P; Bjerke K; Kett K; Kvale D; Rognum T.O; Scott H; Sollid L.M. and Valnes K.
Production and secretion of immuno-globulins in the gastrointestinal tract.
Ann. Allergy; 59(5 Pt 2): 21-39, 1987.
2-Hanson L.A; Hahn-Zoric M; Berndes M; Ashraf R; Herias V; Jalil F; Bhutta T.I; Laeeq A. and Mattsby-Baltzer I. Breast feeding: overview and breast milk immunology.
Acta Paediatr Jpn; 36(5): 557-561. 1994
3-Rujner J; Socha J; Barra E; Gregorek H; Madalinski K; Wozniewicz B;. and Giera B.
Serum and salivary antigliadin antibodies and serum IgA anti-endomysium antibodies as a screening test for celiac disease.
Acta paediatr, 1996. 814-816.
4-Lenander-Lumikari-M; Ihalin-R. and Lahteenoja-H.
Changes in whole saliva in patients with celiac disease.
Arch-Oral Biol. 45(5): 347-354, 2000.
5-Miletic I.D; Schiffman S.S; Miletic V.D. and Sattely-Miller E.A.
Salivary IgA secretion rate in young and elderly persons.
Physiol. Behav. 60(1): 243-282, 1996.
6-Nagao A.T; Pilagallo M. and Pereira A.B.
Quantification of salivary, urinary and fecal sIgA in children living at different conditions of antigenic exposure.
J. Trop Pediatr, 39(5):278-283, 1993.
7-Smith D.J. and Taubman M.A.
Ontogeny of immunity to oral microbiota in humans.
Crit. Rev. Oral. Biol. Med; 3(1-2): 109-133, 1992.
8-Warner R.H; Stevens F.M. and McCarthy C.F.
Salivary sIgA and sIgA 1 in coeliac disease, inflammatory bowel disease and controls.
Ir. J. Med. Sci; 168(1): 33-35, 1999.
|
| المجلد الثالث - العدد 1 - رمضان 1424 - تشرين الأول 2003 |
| |
|
|
|
