يتألف الـLp(a) من مكونين: الـLDL والـ apo(a)، المشابه لمولد البلازمين. وأظهرت العديد من الدراسات أن المستويات المرتفعة للـLp(a) هي عامل خطورة مستقل لأمراض التصلب العصيدي المبكر مع وجود دراسات تنفي وجود مثل هذه العلاقة.
ترتبط التراكيز البلازمية للـ Lp(a) عكسياً مع الوزن الجزيئي الظاهري لمماكبات apo(a). تم اختيار مجموعتين من الأفراد السوريين: أصحاء (56 عينة) ومرضى المجازات (56 عينة) تتراوح أعمار المجموعتين من 33 حتى 71 سنة.
تم تحديد مستويات Lp(a) بطريقة (ELISA)Enzyme-linked immunosorbent assay، أما مماكبات الـapo(a) فتم تحديدها بواسطة الرحلان الكهربائي على هلامة (SDS-Agarose) Sodium Dodecyl Sulfate Agarose 1.5%.
لاحظنا عدم وجود فارق إحصائي هام ما بين التراكيز البلازمية للـ Lp(a) عند الأفراد العرب السوريين الأصحاء والتراكيز البلازميةLp(a) عند مرضى المجازاتBypass (47.79 ملغ/دل للأصحاء مقابل 50 ملغ/دل لمرضى Bypass) وهذا يعني أنه لا يمكن استخدام معايرة Lp(a) كمنبئ لخطر الإصابة بالـ CHD.
وجدنا لدى دراستنا لتوزع الأنماط الظاهرية لدى الأصحاء ومرضى المجازات واتباع تصنيف Utermann et al., 1998 أن النمط السائد هو S2 (عدد تكرارات الكرينغل الرابع أقل من 23 تكرار) لدى مرضى المجازات (27% مقابل 11% للأصحاء) أما النمط الظاهري السائد لدى الأصحاء فهو S4 (عدد تكرارات الكرينغل الرابع أكثر أو تساوي 23 تكرار) (41 % مقابل 21% لمرضى المجازات) أي أن المماكبات ذات الوزن الجزيئي المنخفض هي الأكثر تواتراً عند مرضى Bypass، مقارنة مع الأصحاء الذين يملكون الأوزان الجزيئية المرتفعة من apo(a) مما يؤكد أن النمط الظاهري للـapo(a) منبئ هام لخطرCHD. وبذلك يكون التنميط الظاهري للـ apo(a) مفيداً لتحديد الأشخاص الذين يعانون من خطورة قلبية وعائية.

Lp(a) consists of two components: an LDL particle and an apo(a) molecule, which resembles plasminogen.
Many studies found that high levels of Lp(a) are considered as an independent risk factor of atherosclerotic disease , whereas some others did not find this correlation.
Lp(a) concentration is inversely related to the molecular weight of apo(a) isoform.
Two groups of Syrian patients, healthy (56 subjects) and angiographically assessed bypass patients (56 subjects) were related for this study, the age range for both groups was 33-71 years.
Lp(a) level was determined by ELISA method. whereas apo(a) phenotyping was performed by SDS-Agarose.
Results: We found no significant difference in Lp(a) levels between healthy and bypass groups (47.79 mg/dl vs. 50 mg/dl). we therefore conclude that Lp(a) levels could not be used as an established risk factor for CHD.
Apo (a) phenotype distribution among the two groups was established and when using categorize Utermann et al., 1998, we found that the phenotype S2 (K4 repeat <23) was predominant in bypass patients (27% vs. 11 % in healthy) whereas S4 (K4 repeat ≥23) was predominant in healthy groups (41 % in healthy vs. 21 % bypass patients), which could be interpreted that low molecular weight isoforms are more frequent in bypass patients as compared to healthy group in which high molecular weight isoforms were more frequent. we therefore concluded that apo(a) phenotype is an independent risk factor for CHD.
Apo(a) phenotype is therefore important in locating subjects which are at high risk for developing CHD.

اكتشف LP(a) من قبل العالم Berg عام 1963 (1), وفي عام 1965 نشر التقرير الأول الذي أوضح الترافق بين وجود Lp(a) بالبلازما ومرض التصلب العصيدي الإكليلي من قبل Renninger et al. (2). ثم تتالت بعدها الدراسات العالمية التي تؤيد هذه العلاقة أو تنفيها.
الـ LP(a) عبارة عن بروتين شحمي يضم مكونين أساسين:
الأول يشبه الـ LDL من حيث المكونات البروتينية باحتوائه على الـ apo B-100 ومن حيث المكونات الشحمية، لكن نسبة الغليسريدات الثلاثيةTG لدى Lp(a) أعلى من الـ LDL. أما الثاني فهو عبارة عن بروتين غني بالسكريات (23% من وزنه سكريات) يسمى apo(a)، يرتبط apo(a) تكافؤيا بـ apo B-100 بواسطة روابط ثنائية الكبريت (3) (الشكل 1).
يتميز الـapo(a) بدرجة عالية من التعددية الشكلية Polymorphism, بسبب وجود عدة مماكبات له في البلازما.
وأظهرت نتائج تحليل السلسلة النيكليوتيدية للـ cDNA تشابها كبيراً ما بين apo(a) والبلازمين، وهو عبارة عن بروتين بلازمي متعلق بعملية حل الليفين (4، 5)، كما هو موضح بالشكل 2.
حيث يتألف مولد البلازمين من منطقة SS، منطقة T، منطقة الكرينغل مرقمة من 1 وحتى 5 ثم منطقة البروتياز P.
أما الـapo(a) فيتألف من منطقةSS ، منطقة الكرينغل 4 (تكرارات متعددة من 13- 39)، منطقة الكرينغل 5، منطقة البروتياز P.
وقد يكون هذا التشابه مسبباً لقدرة LP(a) على منافسة مولد البلازمين ومن هنا يستطيع التدخل في عملية حل الخثرة (4، 5).
أظهرت العديد من الدراسات أن المسـتويات
المرتفعة للـ LP(a) هي عامل خطورة مستقل لامراض التصلب العصيدي المبكر (6، 7).
مع ذلك توجد دراسات سلبية لم تجد علاقة ما بين مستويات LP(a) المصلية وأمراض التصلب العصيدي بشكل واضح (8، 9).
كما أظهرت دراسات سكانية عدة وخاصة عند القوقازيين, أن التعددية الشكلية للـ apo(a) هي المسؤولة عن تحديد مستويات LP(a) وخطر أمراض القلب الإكليليةCHD(10)
إن التراكيز البلازمية للـLP(a) ترتبط عكسياً مع الوزن الجزيئي الظاهري لمماكبات apo(a) (11), لذلك فان حجم apo(a) يؤثر على الإصابة بالـCoronary Heart Disease (CHD): إما من خلال التأثير المباشر للتعددية الشكلية للـapo(a) على الإصابة بتصلب الشرايين, أو من خلال التأثير على مستوياتLP(a) (10).

الأفراد: تم اختيار مجموعتين من الأفراد السوريين وذلك من إحدى المشافي التعليمية التي تستقبل المرضى من كافة محافظات القطر العربي السوري.
المجموعة الأولى: الأصحاء وعددهم 56 عينة (38 ذكر + 18انثى)؛
المجموعة الثانية: مرضى المجازات وعددهم 56 عينة (25 ذكر + 31 أنثى) والذي أثبت وجود تضيق في واحد أو أكثر من الشرايين الإكليلية بنسبة أكثر من 50% وذلك عن طريق القثطرة التي أجريت لهم قبل إخضاعهم لعملية المجازات الإكليلية. تتراوح أعمار المجموعتين من 33 حتى 71 سنة.
التحاليل المخبرية: تم سحب عينات الدم في الصباح الباكر بعد صيام 12 ساعة (طوال الليل), ومن ثم وزعت على الشكل التالي:

أ– في أنبوب جاف لإجراء مقايسة للمعالم الشحمية التالية:
TG = Triglycerides
HDL = High - Density Lipoprotein
LDL = Low - Density Lipoprotein
Lp(a) = Lipoprotein (a)

ب– في أنبوب حاوي علىEDTA من أجل إجراء الرحلان الكهربائي على الأغاروز Agarose - SDS 1.5%.
اجري تنبيذ للأنابيب بسرعة 3500 دورة / د لمدة 10 دقائق وتوزيع المصل والبلازما في عدة أنابيب ابندورف وحفظها في المجمدة بدرجة - 80?م لمدة لا تتجاوز الشهرين.
تمت مقايسة كل منTC ، TG،HDL بواسطة عتائد Kits جاهزة من شركةRoche على جهاز آلي من نوع Hitachi 912. أما LDL، فقد حسب عن طريق معادلةFreidwald

(HDL + TG/5)-T.C = LDL

تم تحديد مستويات Lp(a) بطريقة ELISA))Enzyme-linke immunosor-bent assay، عن طريق عتائد Kits جاهزة لشركة Roche. تم تحديد مماكبات apo(a) بواسطة الرحلان الكهربائي على هلامة (SDS-Agarose) 1.5%Sodium dodecyl sulfate –Agarose كما هو موضح في دراسة (1998Couderc et al.)(12). حيث تم الرحلان على هلامة بسماكة 1.5 ملم وأبعاد 14x 16 سم المحتوية على الاغاروز، دارئة تريس، حمض البوريك، Na2 EDTA،SDS في pH = 8.5 ويتم وضعها في وعاء الرحلان بشكل شاقولي.
تم إجراء التلطيخ المناعي بعد نقل البروتينات إلى ورقة نتروسلولوزيةnitrocellulose (NC) عن طريق الضغط لمدة ساعتين، ومن ثم وضع الورقة النتروسلولوزية مع مضاد مصلmonospecific polyclonal rabbit anti-human apo(a) antiserum from Beckman ثم الحضن بـgoat anti-rabbit IgG conjugated with peroxidase (Sigma A4914).
تم رسم منحنى عياري يوضح العلاقة ما بين مسافة هجرة العصابات العيارية ولوغاريتم عدد تكرارات الكرينغل الرابع.
تم تحديد عدد تكرارات الكرينغل الرابع للعينات: بمقارنة مسافة رحلان عصابات العينات مقارنة مع مسافة رحلان عصابات العياري الحاوي على خمس مماكبات كما هو موضح بالشكل 3 حيث تم تطبيق العياري في العينة رقم 3 والعينة رقم 12. تكون عدد تكرارات الكرينغل الرابع لهذه العصابات الخمس للعياري: 35- 27- 23- 19- 14 (IMMUNOFRANCE Ref 4395205).

- دراسة المعالم الانتربومترية:
لدى دراسة الخصائص القياسية البشرية Anthropometrique characteristics (عمر, وزن, BMI) لكل من مجموعة الأصحاء ومرضى Bypass.
حاولنا أن تكون متقاربة لدى كلا المجموعتين, كما هو موضح بالجدول 1.
2- دراسة المعالم الشحمية
أما عند دراسة المعالم الشحمية:
TC = Total Cholesterol
TG = Triglycerides
HDL = High Density Lipoprotein
LDL = Low Density Lipoprotein
لدى كل من الأصحاء ومرضى المجازات، لم نجد فارقاً جوهرياً بين المجموعتين بالنسبة لكل منTC و TG. أما LDL فقد كان مرتفعاً قليلاً عند الأصحاء مقارنة مع مرضى المجازات.
لقد وجدنا فارقاً جوهرياً فقط لدى مقارنة تركيز HDL لدى كل من الأصحاء ومرضى المجازات حيث كان تركيز HDL لدى الأصحاء 54.29? 13.87 مغ/ دل مقابل 40.80 ?14.88 مغ/ دل عند مرضى المجازات. والجدول 2 يوضح ما ذكر سابقاً

عند دراسة توزع تراكيز Lp(a) لكل من الأصحاء ومرضى المجازات، ورسم منحنى التوزع التكراري لتوزع التراكيز لوحظ أن 23% من عينات الأصحاء تتراوح تراكيزهم بين 0- 10 مغ/ دل، مقابل 11% لمرضى المجازات، و23% من عينات مرضى Bypass تراوحت بين 20- 30 مغ/ دل مقابل 9% للأصحاء كما هو موضح بالشكل 4.
ثم قمنا بحساب المتوسط الحسابي Mean لكل من المجموعتين، فلاحظنا عدم وجود فارق جوهري بينهما وكان الانحراف المعياري SD كبير لدرجة أنه يساوي المتوسط الحسابي، إضافة إلى المجال الكبير لتوزع قيم Lp(a) بين 2.41 وحتى 147.47 مغ/ دل، لذلك قمنا بحساب الوسيط الحسابيMedian لكلا المجموعتين ومع ذلك لم نجد فارقاً جوهرياً بالتركيز ما بين الأصحاء ومرضى Bypass. والجدول 3 يوضح ذلك.

1- عدد الألليلات المكتشفة:
عند إجراء الرحلان الكهربائي على هلامة SDS-Agarose 1.5% تم الكشف عن 25 الليل تتراوح عدد التكرارات الكرينغل الرابع فيهم من 13 حتى 39، مع ملاحظة عدم وجود الالليلين اللذين لهما عدد تكرار الكرينغل الرابع 14 و36. وتم الكشف عن 83 نمط من أصل 325 محسوبة حسب قانون الاحتمالات أي بنسبة 25.5%. وهو مقارب لما ذكر في دراسة Couderc et al. (12) حيث كانت النسبة 21.9%.

2- توزع الأنماط الظاهرية ما بين متماثلي الزيجوت ومتخالفي الزيجوت:
وعند دراسة جميع العينات (أصحاء + مرضى) من حيث نسبة العينات متماثلة الزيجوت Homozygote (العينات الحاوية على عصابة واحدة) والعينات متغايرة الزيجوت Heterozygote (العينات الحاوية على عصابتين).
كانت نسبة عينات Homo= 54 عينة ونسبتها 48.6%. أما عدد عينات Hetero = 57 عينة ونسبتها 51.3%.
أما عند فصل عينات الأصحاء عن عينات مرضى Bypass، فكانت قيم متماثلي الزيجوت ومتغايري الزيجوت والعينات عديمة العصابةNull ، كما هي موضحة بالجدول 4.
نلاحظ أن نسبة Heteroتكون أكبر عند مرضى Bypass مقارنة بنسبة Hetero عند الأصحاء، والشكل 5 يوضح ذلك.

3- مقارنة توزع الأنماط الظاهرية ما بين الأصحاء ومرضى المجازات:
تم اختيار العصابة الأسرع (العصابة التي تملك عدد تكرارات أقل من الكرينغل الرابع وبالتالي تقطع مسافة أطول بالرحلان) لمقارنة توزع الأنماط الظاهرية ما بين الأصحاء ومرضى المجازات في حال وجود عصابتين للعينة الواحدة، وذلك وفقاً لما اتبع في دراسة Couderc et al. 1998 (12).
وعند تقسيم عدد تكرارات الكرينغل الرابـع لأنماط حسب ما ذُكر في دراسةCouderc et al. 1998 (12). حيث يتعين كل نمط بعدد تكرارات محدد من تكرارات الكرينغل الرابع (للعصابة الأسرع)، كما هو موضح بالجدول 6.

وعند تطبيق الجدول السابق على عينات كل من الأصحاء ومرضى Bypass، كانت لدينا النتائج الموضحة بالجدول 7.
نلاحظ أن النمط الشائع عند مرضى Bypass هو S2 حيث بلغت نسبته 27% عند مرضى Bypass، مقابل 11% عند الأصحاء. أما النمط الشائع عند الأصحاء فهوS4 ونسبته 41%، مقابل 22% لمرضى Bypass، كما هو موضح بالشكل 6.
وهذا يؤكد أن الأنماط الظاهرية ذات الوزن الجزيئي المنخفض هي المرافقة لمرضى Bypass، بينما الأنماط الظاهرية ذات الوزن الجزيئي المرتفع فهي المرافقة للأصحاء. وهذا موافق لعدة دراسات عالمية، منهاBigot et al. 1997 (10).

نستنتج عدم وجود فارق إحصائي هام ما بين التراكيز البلازمية للـ Lp(a) عند الأفراد السوريين الأصحاء والتراكيز البلازمية Lp(a) عند مرضى Bypass (47.79 مغ/دل للأصحاء مقابل 50 مغ/ دل لمرضىBypass). وهذا يعني أنه لا يمكن استخدام معايرة Lp(a) كمنبئ لخطر الإصابة بالـ CHD.
وجدنا لدى دراستنا لتوزع الأنماط الظاهرية لدى الأصحاء ومرضى المجازات أن النمط السائد هوS2 لدى مرضى المجازات (27%) أما النمط الظاهري السائد لدى الأصحاء فهوS4 (41%) أي أن المماكبات ذات الوزن الجزيئي المنخفض هي الأكثر تواترا عند مرضى Bypass، مقارنة مع الأصحاء الذين يملكون الأوزان الجزيئية المرتفعة من apo(a) مما يؤكد ان النمط الظاهري للـ apo(a) منبئ هام لخطر CHD. وبذلك يكون التنميط الظاهري للـ apo(a) مفيداً لتحديد الأشخاص الذين يعانون من خطورة قلبية وعائية.