بحث في أعداد المجلة
الجملة  
المؤلف   
 

المجلد 3 , العدد 6 , ذي القعدة 1425 - كانون الثاني (يناير) 2005
 
مقارنة قيم أضداد الغليادين في المصل واللعاب فيما بين أسوياء ومرضى الداء الزلاقي
Comparison of the Values of Antigliadin Antibodies (AGA)
in Serum and Saliva of Normal and Coeliac Patients Groups
د. سلمى عيسى*، د. إميل شاهين* و د. عبدو جرجس**
Salma Essa*, Emile Chahine* and Abdo Jurjus**
*كلية الصيدلة – جامعة دمشق، **كلية الطب - الجامعة الأمريكية، بيروت
الملخص Abstract
مقدمة: نظراً لنسبة الانتشار العالية للداء الزلاقي في سورية وبشكل خاص لدى الأطفال، فإنه من الضروري إيجاد طرق تشخيصية لهذا المرض تكون أكثر سهولة من إجراء الخزعة المعوية أو بضع الوريد لأخذ عينة الدم، خاصة وأن الدراسات تشير إلى تواجد أضداد نوعية للداء الزلاقي في سوائل البدن الأخرى مثل اللعاب.
المرضى والطرق: شملت دراستنا 187 طفلاً تراوحت أعمارهم بين 2-16 عاماً مقسمين في ثلاث مجموعات: مجموعة شاهدة (116 طفلاً)، مجموعة مرضى غير معالجين مشخصين على أساس الخزعة (35 طفلاً)، مجموعة المرضى المحميين (36 طفلاً). قمنا بمقايسة أضداد الغليادين في كل من المصل واللعاب لدى جميع مجموعات الدراسة وذلك بطريقة ELISA باستخدام عتائد لشركة RADIM.
النتائج: ارتفاع يعتد به إحصائياً في قيم AGA المصلية واللعابية لدى المرضى غير المعالجين مقارنة مع المجموعة الشاهدة, وظهرت علاقة ارتباط ايجابية بين قيم AGA المصلية واللعابية لدى المرضى غير المعالجين. كما ظهر انخفاض يعتد به إحصائياً في قيم AGA المصلية واللعابية لدى المرضى المعالجين بالمقارنة مع المرضى غير المعالجين.
الاستنتاج: إن عملية جمع اللعاب تُعد سهلة وغير باضعة، ومن السهل جمع النموذج الذي يمكننا استخدامه في مقايسة EMA من أجل تشخيص الداء الزلاقي ومتابعته لدى الأطفال.  
Introduction: Because of the High prevalence of coeliac disease (CD) in Syria especially in children, it is necessary to find diagnostic techniques for this disease which are easer than
intestinal biopsy or venotomy. Some studies shows that other body fluids such saliva may contain CD specific antibodies.
Material and method: This study involved 187 children their age range between 2-16 year, they divided into three groups: control group (116 child), untreated patients in whom CD is confirmed by intestinal biopsy (35 child), treated patients (36 child). Antigliadin antibodies were measured by enzyme-linked immunosorbant assay ELISA by using RADIM kits in serum, saliva.
Results: The Levels of antigliadin antibodies were elevated significantly in serum and saliva of untreated patients compared with that of control group, there was positive correlation between the concentration of AGA in serum and the concentration in saliva. We found remarkable decrease in AGA in serum and saliva of treated patients compared with that of untreated patients.
Conclusion: As the saliva is simple, rapid, noninvasive, and easy to collect specimen we can use it in the assay of EMA for the diagnosis and follow up of Coeliac disease in children.  
المقدمة Introduction 
الداء الزلاقي هو اضطراب وراثي يصيب الجهاز المناعي ويؤدي فيه تناول الغلوتين القوتي إلى أذية مخاطية المعي الدقيق, والتي ينجم عنها سوء امتصاص الأغذية والفيتامينات.
هذا وقد يكون لدى الإنسان ميل للإصابة بالمرض دون ظهور الأعراض عليه فتؤدي بعض العوامل لتحريض ظهوره مثل: العمل الجراحي, المخاض, انتان فيروسي, أو صدمة نفسية شديدة (1).
يظهر الداء الزلاقي إما بمظهره التقليدي classic presentation ويتجلى بأعراض هضمية, فشل نمو, وأعراض معوية. أو أنه يتظاهر بأشكاله غير النموذجيةatypical forms التي يظهر فيها غالباً فقر دم وقصر قامة. أو أن يظهر بشكله الصامت silent form الذي يصيب غالباً أقرباء مرضى الداء الزلاقي من الدرجة الأولى (2).
يزداد انتشار الداء الزلاقي لدى الأفراد الذين لديهم قيماً مرتفعة لمستويات الإنزيم الناقل للأمين aminotransferase, أو مرضاً مناعياً ذاتياً autoimmune disease, أو زيغاً صبغياً chromosomal aberration.
تتجلى اختلاطات الإصابة طويلة الأمد بالداء الزلاقي باعتلال العظم osteopathy, وباعتلال صمّاوي endocrinopathy, عقم infertility, وحدوث رُضع ذوي وزنٍ ولادي منخفضّ, خباثة, اعتلال قلب وأنماط مختلفة للقصور القلبي.
للإقلال من المخاطر المترافقة مع التعرض
طويل الأمد للغلوتين, يجب تشخيص الداء الزلاقي بوقت مبكر (3), بالاعتماد على إجـراء الخـزعة المعويـة لمرة واحـدة أو
أكثـر intestinal biopsies.
إن مرضى الداء الزلاقي الذين يتناولون نظاماً غذائياً حاوياً على الغلوتين لديهم مستويات مرتفعة لأضداد الغليادين (الدبق) antigliadin (AGA), أضداد الاندوميزيوم (أضداد القميص البطاني) antiendomysium (EMA), والأضداد الذاتية للترانس غلوتاميناز النسيجية anti-tissue transglutaminase autoantibodies (anti-t TG-A) (4).
ونظراً لنسبة الانتشار الواسعة للداء الزلاقي في سورية وبشكل خاص لدى الأطفال (1/67)(5)، فإنه من الضروري إيجاد طرق تشخيصية لهذا المرض تكون أكثر سهولة (6) من إجراء الخزعة المعوية أو بَضْع الوريد لأخذ عينة الدم، خاصة وأن الدراسات (7) تشير إلى تواجد الأضداد في سوائل البدن الأخرى وأهمها اللعاب (8). لقد قمنا بدراسة تراكيز أضداد الغليادين في كل من المصل واللعاب لدى المرضى المشخصين والخاضعين للحمية الخالية من الغلوتين بالمقارنة مع مجموعة مراقبة سليمة وذلك لمعرفة الأهمية التشخيصية والمطاوعة (الاستجابة) على العلاج لهذه الأضداد في اللعاب ودراسة الارتباط بين تراكيزها في اللعاب والمصل.
وقد قمنا بتحديد المجال المرجعي لتراكيـز أضداد الغليادين في المصل واللعاب لدى أطفال سوريين. ا  
المواد والطرق Materials and Methods 
مجموعات الدراسة:
تضمنت دراستنا 187 حالة تراوحت أعمارهم بين 2- 16 عاماً (متوسط الأعمار 7 ± 4 سنوات) وتم تقسيمهم وفق المجموعات التالية:
أولاً- مجموعة المرضى غير المعالجين (35 حالة)، وقد تم أخذ جميع الحالات من المراجعين للعيادة الهضمية لمستشفى الأطفال بجامعة دمشق وفق المعايير التالية:
1- موجودات الخزعة المعوية لجميع المرضى تتماشى مع الداء الزلاقي.
2- يعاني جميع المرضى من فشل (نقص) نمو، إسهال حاد، فقر دم، نقص وزن، ألم بطني، وهن، نقص شهية.
ثانياً- مجموعة المرضى الخاضعين للحمية الخالية من الغلوتين (36 حالة) تم اختيارهم وفق المعايير التالية:
1- تشخيص جميع المرضى مثبت بالخزعة.
2- تحسن الحالة السريرية للمرضى مما يدل على استجابة للحمية.
ثالثاً- المجموعة الشاهدة (116 شخص، أسوياء ظاهرياً)، تم اختيارهم وفق المعايير التالية:
1- غير مصابين بأمراض معوية.
2- غير مصابين بالداء السكري.
3- غير مصابين بأمراض التهابية شديدة عند سحب العينات.
4- لا يتناولون الستيرويدات القشرية Corticosteroids  
الاعتيان Sampling 
يؤخذ 5 مل من الدم من كل شخص (المرضى والشواهد) على أنبوب جاف (لا يحتوي على مضاد تخثر) ويترك لمدة 30 دقيقة بدرجة حرارة الغرفة كي يتخثر ثم ينبذ بسرعة 3500 دورة/ دقيقة مدة 7 دقائق. ويُوزع المصل على أنابيب ايبندورف ثم تجمد بالدرجة - o80م إلى حين إجراء الاختبارات خلال 6 أشهر.
كما يُؤخذ 2 مل من اللعاب بواسطة ممصات بلاستيكية معقمة وحيدة الاستخدام (Falcon pipette®)، يُوزع اللعاب على ثلاثة أنابيب ايبندورف ثم تجمد بالدرجة - o80م إلى حين إجراء الاختبارات خلال 6 أشهر.
تم إجراء مقايسة أضداد الغليادين نمط IgA في كل من المصل واللعاب بطريقة الامتزاز المناعي المرتبط بالإنزيم Enzyme Linked Immmunosorbant Assay (ELISA) باستخدام عتائد لشركة RADIM وذلك في مخبر البحث العلمي بكلية الصيدلة.  
النتائج Results 
أولاً- المجموعة الشاهدة: تراوحت تراكيز أضداد الغليـادين المصلية لدى المجموعة الشاهدة (Med ± SD = 4.4 ± 3.2 Relative unit/ml). في حين تراوحت تراكيز هذه الأضداد في اللعاب (Med ± SD = 2.8 ± 2.4 Relative unit/ml )، الشكل 1. ثانياً- مجموعة المرضى غير المعالجين: أظهرت نتائجنا ارتفاعاً يعتد به إحصائياً في تراكيز أضداد الغليادين المصلية لدى المرضى غير المعالجين (133 ± 88.1 Ru/ml) بالمقارنة مع المجموعة الشاهدة حيث كانت قيمة P<0.0004. كما أظهرت نتائجنا ارتفاعاً يعتد به إحصائياً في تراكيز أضداد الغليادين اللعابية لدى المرضى غير المعالجين (16.37 ± 5.11 Ru/ml) بالمقارنة مع المجموعة الشاهدة حيث كانت قيمة P<0.0006، الشكل 2. ثالثاً- مجموعة المرضى الخاضعين للحمية الخالية من الغلوتين: أظهرت نتائجنا انخفاضاً يعتد به إحصائياً في تراكيز أضداد الغليادين المصلية لدى المرضى الخاضعين للحمية الخالية من الغلوتين (6.77 ± 4.3 Ru/ml) بالمقارنة مع مجموعة المرضى غير المعالجين حيث كانت قيمة P<0.0007، الشكل 3. كما أظهرت نتائجنا انخفاضاً يعتد به إحصائياً في تراكيز أضداد الغليادين اللعابية لدى المرضى الخاضعين للحمية الخالية من الغلوتين ( 1.76 ± 1.9 Ru/ml) بالمقارنة مع مجموعة المرضى غير المعالجين حيث كانت قيمة P<0.0001، الشكل 4.  

الشكل 1: مقارنة تركيز أضداد الغليادين IgA في المصل بين مجموعة الشاهدة ومجموعة المرضى غير المعالجين.

الشكل 2: مقارنة تركيز أضداد الغليادين IgA في اللعاب بين مجموعة الشاهدة ومجموعة المرضى غير المعالجين

الشكل 3: مقارنة تركيز أضداد الغليادين IgA في المصل بين مجموعة المرضى غير المعالجين ومجموعة المرضى المعالجين.

الشكل4: مقارنة تركيز أضداد الغليادين IgA في اللعاب بين مجموعتي المرضى غير المعالجين والمعالجين
المناقشة Discussion 
تبين نتائجنا ارتفاعاً واضحاً في تراكيز أضداد الغليادين المصلية لدى المرضى غير المعالجين بالمقارنة مع المجموعة الشاهدة، وهذا يؤكد الأهمية التشخيصية لهذا المتثابت. وهذا يتوافق مع دراسة Genoroberto وزملائه في ايطاليا عام 1992 (Genoroberto et al., 1992)(9). كما تبين نتائجنا انخفاض قيم الغليادين المصلية لدى مجموعة المرضى المعالجين مقارنة مع المرضى غير المعالجين وهذا يثبت أهميته في متابعة الاستجابة للعلاج. وتتوافق هذه النتيجة مع دراسة Kelly وزملائـه عام 1992 في ايـرلنـدة (Kelly et al., 1992)(10). كما أظهرت دراستنا ارتفاع تراكيز أضـداد الغليادين اللعابية لدى المرضى غير المعالجين مقارنة مع المجموعة الشاهدة ويمكن تفسير ذلك بأن التغيرات المناعية للداء الزلاقي تنعكس على المفرزات الفموية أيضاً. وبما أن عملية جمع اللعاب تُعد سهلة وغير باضعة بالمقارنة مع عينة الدم، وبشكل خاص لدى الأطفال، فإنه من الممكن استخدام عينة اللعاب في تشخيص الداء الزلاقي لدى الأطفال.
تتوافق هذه النتيجة مع دراسة Danelia وزملائه في ايطاليا عام 2001 (Danelia et al., 2001)(11). ودراسة Hakeem وزملائه في كارديف عام 1992 (Hakeem et al., 1992)(12).  
المراجع References 
1- Bethesda MD.
Celiac Disease.
National Digestive Diseases Information Clearinghouse.
NIH Publication, No.03-4269, 2003.

2- Jurjus A.R; Assad A; Chahine E; Alkhoury K; Abdallah I. and Ilya E.
Malabsorption and a place for secretory immunoglobulin A from saliva.
The American Society for Cell Biology. San Francisco, California. December 2003.

3- Alkhoury K; Chahine E; Jumaa M. and Jurjus A.
Celiac disease Diagnosis: A comparative study.
The Sixth Joint Meeting of the Japan Society of Histochemistry and Cytochemistry and the Histochemical Society. 2002.

4-Margherita Bonamico, Mirella Ferri, Raffaella Nenna, Antonella Verrienti, Umberto Di Mario and Claudio Tiberti.
Tissue transglutaminase autoantibody detection in human saliva: a powerful method for celiac disease screening.
From Institute of Paediatrics and Department of Clinical Science, University of Rome "La Sapienza,", Italy. 29 April 2003.

5- شلار، جمعة وشاهين.
ما تقدمه مقايسة أضداد الترانس غلوتاميناز النسيجية في التشخيص التفريقي لسوء الامتصاص الهضمي. مجلة المجلس الغربي لاختصاصات الطبية، 6(2)، 2004.

6- كنان خوري، اميل شاهين، عبدو جرجس، محي الدين جمعة والياس ايليا.
الغلوبولين المناعي A الافرازي في اللعاب sIgA وسيلة تشخيصية جديدة وغير باضعة للداء ا لبطني (الزلاقي).
مجلة التشخيص المخبري، 3(1), 2003.



7- Pertti Patinen
Oral findings in Dermatitis Herpe-tiformis and Coeliac Disease.
P 46. Helsinki 2004.

8- Khoury K., Chahine E., Jumaa M., Ilya E. and Jurjus A.
Celiac Disease: Serological and salivary screening in Syria and Libanon.
The American Society for Cell Biology. 14-18, 2002.

9-Ginorberto Corazza, Rodolfo A. valentini, Magda Frisoni, Umberto Volta, Giovanni Corrao, Francesco B. Bianchi and Giovanni Gasbarrini.
Gliadin Immune Reactivity associated with overt and latent enteropathy in relatives of celiac patients.
Gastroenerology, 103: 1517-1522. 1992.

10- Kelly CP, Feighery CF, Gallagher RB, Gibney MJ and Weir DG.
Mucosal and systemic IgA anti-gliadin antibody in celiac disease. Contrasting patterns of response in serum, saliva, and intestinal secretions.
Dig Dis Sci, 36(6): 743-751. 1991.

11- Danelia Marinello, Anan Rapa, Raffaella Osello, Barbara Ronchi, Annalisa Zavallone, Gianni Bona, and Giusppina Oderda.
Celiac Disease screening; Exploring the Iceberg with salivary Antigliadin Antibodies. Journal of pediatric Gastro-enterology and Nutrition, 32: 227-228, 2001.

12-Hakeem V, Fifield R, al-Bayaty HF, Aldred MJ, Walker DM, Williams J, Jenkins HR.
Salivary IgA antigliadin antibody as a marker for coeliac disease.
Arch Dis Child. 67(6): 724-727. 1992.  
 
المجلد 3 , العدد 6 , ذي القعدة 1425 - كانون الثاني (يناير) 2005

 
 
SCLA
  ©  2003 - 2004    SCLA All rights reserved By Platinum Inc.