| الملخص Abstract |
تم مؤخراً استعراف سيتوكين شحمي اسمه الأديبونكتين، يُعبّر عنه في النسيج الشحمي. يزيد الأديبونكتين الحساسية على الأنسولين في كافة أنحاء الجسم، وقد افتُرض أن له علاقة مع الداء السكري من النمط الثاني.
شملت دراستنا 168 شخصاً وزعوا ضمن ثلاث مجموعات: المرضى السكريين من النمط الثاني (45 مريضاً)، والمرضى السكريين المصابين بمرض قلبي وعائي (63 مريضاً)، والأشخاص الأسوياء ظاهرياً (الشواهد) (60 شخصاً). جرى تعيين مستويات أديبونكتين المصل لدى الأفراد المدروسين باستخدام المقايسة المناعية الشعاعية RIA. وجدنا أن مستويات الأديبونكتين لدى المرضى السكريين والمرضى السكريين الذين يعانون من مرض قلبي وعائي كانت مرتفعة مقارنة مع الأشخاص الأسوياء، مما يظهر أن للأديبونكتين علاقة بالداء السكري من النمط الثاني.
|
| Recently, a new adipocytokine called “adiponectin” has been identified and it is expressed in adipose tissue. Adiponectin is capable of causing increased whole-body insulin sensitivity, and it was hypothesized that adiponectin has relation with diabetes mellitus type 2. Our study included 168 subjects were distributed into three groups: Patients suffering from diabetic type 2 (45 patients), diabetic patients with cardiovascular disease (63 patients), and apparently normal subjects (controls) (60 subjects). Serum adiponectin levels were determined in studied individuals by using radioimmuneassay (RIA). We found that adiponectin levels of diabetic patients and diabetic with cardiovascular disease patients were high compared with normal subjects, which is revealed that adiponectin has relation with diabetes mellitus type 2. |
| المقدمة Introduction |
أصبح واضحاً في الآونة الأخيرة أن النسيج
الشـحمي يعمـل كعضو صـماوي داخـلي
Endocrine organ ويفرز بروتينات كثيرة
استجابة لمنبهات متنوعة (1). ومن هذه البروتينات التي لها علاقة باستقلاب الغلوكوز والشحم وبالتالي تستطيع التأثير على المقاومة على الأنسولين: الأديبونكتين.
الأديبونكتين بروتين إفرازي نوعي للخلايا الشحمية تم تحديده مؤخراً، وزنه الجزيئي بحدود 30 ك د. يساهم في تنظيم ميزان الطاقة وفعل الأنسولين وله خصائص مضادة للالتهاب ومضادة للتعصد (2-4). يسمى الأديبونكتين أيضاً Adipo Q ، وذُكر أيضاً.
(adipocyte complement related protein 30 KDa) Acrp30
(adipose tissue most abundant gene transcript-1) apM1
(Gealtin- binding protein 28) GBP28
يتألف الأديبونكتين من 244 ثمالة حمض أميني وهو يشبه بنيوياً بروتين المتممة C1q (5، 6)، تقع جين الأديبونكتين على الصبغي 3q27 (7).
وجد Scherer وزملاؤه أن الزيادة الحادة في أديبونكتين الدوران يحفز انخفاضاً عابراً في مستوى الغلوكوز عن طريق تثبيط إفراز إنزيمات الكبد المسؤولة عن استحداث الغلوكوز وعن طريق خفض معدل إنتاج الغلوكوز الداخلي المنشأ عند الفئران المصابة بالداء السكري (8).
كما أظهرت الدراسات أن الأديبونكتين يزيد من أكسدة الأحماض الدهنية في العضلات وينقص غلوكوز البلازما ويسبب انخفاض الوزن عند الفئران، ووجد أن الأديبونكتين يحفز فسفرة كيناز الأدينوزين أحادي الفسفاتAdinosine Monophosphate Kinase (AMPK) في كل من الكبد والعضلات الهيكلية وبالتالي يخفض من استحداث الغلوكوز الكبدي عن طريق تثبيط إنزيمات مثل الفسفو إينول بيروفات كربوكسي كيناز والغلوكوز 6- فسفاتاز، كما أن الـ AMPK يحفز أكسدة الأحماض الدهنية وقبط الغلوكوز في العضلات الهيكلية (9).
كما بينت الدراسات الحديثة أن الأديبونكتين يزيد من احتراق الأحماض الدهنية واستهلاك الطاقة مما يؤدي إلى انخفاض محتوى الكبد والعضلات الهيكلية من ثلاثي الغليسريد مع زيادة متناسقة في الحساسية على الأنسولين في الأحياء in vivo.
|
| المواد والطرق Materials and Methods |
شملت دراستنا 168 فرداً موزعين إلى المجموعات التالية:
- مجموعة مرضى الداء السكري من النمط الثاني دون إصابات أخرى (45 فرداً): مرضى داء السكري من النمط الثاني يتناولون على الأقل أحد خافضات السكر الفموية، منذ سنتين على الأقل، ولم يكن الغلوكوز لديهم مضبوطاً تماماً (متوسط تركيز غلوكوز المصل 198 مغ/ دل)، متوسط منسب كتلة الجسـم BMI لهم 28.6 كغ/م2، تراوحت أعمارهم بين 45-75 عاماً.
- مجموعة مرضى الداء السكري من النمط الثاني مع مرض قلبي وعائي (63 فرداً): وهم مرضى داء سكري من النمط الثاني مع مرض قلبي وعائي، منذ سنة على الأقل، يتناولون على الأقل أحد خافضات السكر الفموية، متوسط منسب كتلة الجسم لهم 29.6 كغ/م2، وتراوحت أعمارهم بين 45-73 عاماً.
- المجموعة الشاهدة (60 فرداً): أفراد أسوياء ظاهرياً (لا يعانون أية إصابة غدية أو قلبية ولا يتناولون أية أدوية، لأنها تؤثر على المتثابتات الأخرى المدروسة مثل الغلوكوز، الكوليستيرول، ثلاثيات الغليسريد، HDLc، LDLc)، متوسط منسب كتلة الجسم لهم 26.4 كغ/م2 تراوحت أعمارهم بين 43–74 عاماً.
تمّ جمع العينات في الفترة ما بين 3/2/2006 و 22/5/2006 من مراجعي المراكز الطبية التالية:
- مستشفى المواساة الجامعي، شعبتي الأمراض الداخلية وأمراض الغدد الصم.
- مركز العيادات الشاملة التابع لوزارة الصحة.
- مستشفى الأسد الجامعي، العيادات الخارجية، عيادة الغدد الصم.
- وتم جمع معظم عينات المجموعة الشاهدة من متطوعين أصحاء لا يراجعون أي مركز طبي.
أخذت عينات الدم (5 مل دم وريدي على أنبوب جاف) على الريق بعد صيام ليلة كاملة في الفترة ما بين الساعة الثامنة والعاشرة صباحاً ونبذت مباشرة (2000 دورة في الدقيقة مدة 10 دقائق) ووزع المصل الناتج على أربعة أنابيب إيبندروف، في كل أنبوب 300 – 500 مكل مصل باستخدام ممص ميكروي Micropipete.
- حُفظت العينات عند الدرجة -80 °م إلى وقت إجراء المقايسات، أي حوالي أربعة أشهر كحد أقصى.
- استخدمت القسيمة الأولى لكل عينة لمقايسة الأديبونكتين والقسيمة الثانية لمقايسة المتثابتات الكيميائية الحيوية وبقيت القسيمتان الثالثة والرابعة احتياطيتين.
أجريت مقايسة الأديبونكتين بطريقة المقايسة المناعية الإشعاعية RIA، باستخدام عتيدة Human Adiponectin RIA لشركة Linco باستخدام أديبونكتين موسوم بـ I125 ومصل ضدي حساس للأديبونكتين لتحديد مستوى الأديبونكتين في المصل.
- مبدأ المقايسة بطريقة RIA
يُحضن تركيز ثابت من مستضد قائف موسوم مع تمديد معين من مصل ضدي بحيث يكون تركيز المواقع التي تربط المستضد على الضد محدودة، وعند إضافة مستضد غير موسوم إلى هذه الجملة يحصل تنافس بين القائف الموسوم والمستضد غير الموسوم على المواقع الرابطة المحدودة الثابتة للضد.
وهكذا فإن كمية القائف المرتبطة مع الضد سوف تتناقص بازدياد تركيز المستضد غير الموسوم، وهذا يمكن قياسه بعد فصل القائف المرتبط مع الضد عن القائف الحر وحساب أحد الجزأين أو كليهما. يتم إنشاء منحنى عياري بتراكيز متزايدة من مستضد عياري غير موسوم ومن هذا المنحنى يمكّن من حساب كمية المستضد في العينات غير المعروفة وهكذا فإن المتطلبات الأساسية الأربعة لجملة المقايسة المناعية الإشعاعية هي:
• مصل ضدي نوعي للمستضد المراد قياسه.
• توفر شكل موسوم شعاعياً من المستضد.
• طريقة لفصل القائف المرتبط بالضد عن القائف غير المرتبط.
• جهاز لقياس الفعالية الإشعاعية.
أجريت مقايسات الغلوكوز والكوليستيرول الكلي وثلاثيات الغليسريد بالإضافة إلى
HDLc و LDLc، باستخدام عتائد جاهزة للعمل على جهاز هيتاشي 912.
تمت الدراسة الإحصائية باستخدام اختبار T-student لتحديد ما إذا كان الفارق بين المتوسطات ناجماً عن المصادفة أم حقيقياً واعتمد معامل Pearson للارتباط لدراسة علاقة الارتباط بين متثابتات المجموعة الواحدة واعتمدت p < 0.05 كقيمة يعتد بها إحصائياً.
|
| النتائج Results |
بلغ متوسط قيم الأديبونكتين لدى مجموعة مرضى السكري 3.9±0.39 مكغ/مل (تراوحت قيم الأديبونكتين بين 3.1–4.8 مكغ/مل)، وبلغ متوسط قيم الأديبونكتين لدى مجموعة مرضى السكري مع مرض قلبي وعائي 3.7±0.53 مكغ/مل (تراوحت قيم الأديبونكتين بين 2.8-4.7 مكغ/مل)، وبلغ متوسط قيم الأديبونكتين لدى مجموعة الأسوياء 7.02±0.88 مكغ/مل (تراوحت قيم الأديبونكتين بين 5.4-8.6 مكغ/مل).
بتطبيق اختبار T-test لوحظ فارق ذو دلالة إحصائية بين مستويات الأديبونكتين لدى مجموعة الأسوياء ومتوسط مستويات الأديبونكتين لدى مجموعة مرضى الداء السكري من النمط الثاني (p< 0.05)، كما لوحظ فارق ذو دلالة إحصائية بين مستويات الأديبونكتين لدى مجموعة الأسوياء ومتوسط مستويات الأديبونكتين لدى مجموعة مرضى الداء السكري من النمط الثاني دون إصابة قلبية وعائية ومع مرض قلبي وعائي (p< 0.05) (الشكل 1).
بدراسة العلاقة بين الأديبونكتين والغلوكوز لدى مرضى الداء السكري نمط 2، دون إصابة قلبية وعائية، لوحظت بينهما علاقة ارتباط يعتد بها إحصائياً (R= -0.49، (p< 0.05 (الشكل 2).
بدراسـة العلاقة بين الأديبونكتين والغلوكوز لدى مرضى الداء السكري نمط 2، مع مرض قلبي وعائي، لوحظت بينهما علاقة ارتباط يعتد بها إحصائياً (R= -0.8، (p<0.05 (الشكل 3).
لوحظت علاقة ارتباط عكسية يُعتد بها إحصائياً (r = - 0.73، P<0.05) بين قيم الأديبونكتين والكوليستيرول لدى مجموعة مرضى السكري من النمط 2 الذين يعانون من إصـابة قلبيـة وعائية، في حين غابت هذه العلاقة لدى مجموعة مرضى السكري من النمط 2 دون إصابة قلبية وعائية، وارتبطت قيم ثلاثيات الغليسريد مع الأديبونكتين بعلاقة عكسية يُعتد بها إحصائياً لدى أفراد المجموعتين السابقتين (r = - 0.73، r = -0.63، P > 0.05، على الترتيب).
|
| لوحظت أيضاً علاقة ارتباط عكسية يُعتد بها إحصائياً بين قيم منسب كتلة الجسم BMI وقيم
الأديبونكتين لدى مجموعتي الدراسة، حيث وجدنا أن r = - 0.71 و P > 0.05 لدى مجموعة الداء السكري نمط 2 دون مرض قلبي وعائي و r = - 0.64 و P <0.05 لدى مجموعة الداء السكري نمط 2 المصابين بمرض قلبي
وعائي (الشكلان 4 و 5). |
الشكل 1: متوسط تركيز الأديبونكتين لدى مجموعات الدراسة.
الشكل 2: علاقة الارتباط بين الأديبونكتين والغلوكوز لدى مرضى الداء السكري نمط 2 دون إصابة قلبية وعائية.
الشكل 3: علاقة الارتباط بين الأديبونكتين والغلوكوز لدى مرضى الداء السكري نمط 2
مع مرض قلبي وعائي.
الشكل 4 : العلاقة بين الأديبونكتين والـ BMI عند مجموعة مرضى الداء السكري نمط 2 ، دون إصابة قلبية وعائية، لوحظت بينهما علاقة ارتباط يعتد بها إحصائياً (r= -0.71 ، (p < 0.05 .
الشكل 5 : العلاقة بين الأديبونكتين والـ BMI عند مجموعة مرضى الداء السكري نمط 2، المصابين بمرض قلبي وعائي، لوحظت بينهما علاقة ارتباط يعتد بها إحصائياً (R= -0.64 ، (p < 0.05 .
|
| المناقشة Discussion |
وجدنا من خلال الدراسة التي أجريناها انخفاضاً واضحاً في مستويات الأديبونكتين لدى كل من
مرضى الداء السكري دون إصابات أخرى ومرضى الداء السكري مع مرض قلبي وعائي مقارنة مع مجموعة الأسوياء، حيث بلغت قيم الأديبونكتين لدى مرضى الداء السكري دون إصابات أخرى 3.9±0.39 مكغ/مل ولدى مرضى الداء السكري مع مرض قلبي وعائي 3.7±0.53 مكغ/مل ولدى مجموعة الأسوياء 7.02±0.88 مكغ/مل.
ووجدنا ارتباطاً بين مستويات الأديبونكتين ومستويات الغلوكوز لدى كل من مرضى الداء السكري من النمط الثاني دون إصابات أخرى ومرضى الداء السكري من النمط الثاني مع مرض قلبي وعائي.
توافقت نتائج دراستنا مع دراسة Tomas وزملائه 2002 حيث وجدوا أن الأديبونكتين ينظم بشكل مباشر استقلاب الغلوكوز والحساسية على الأنسولين ((11، ودراسة Lyon وزملائه 2003 حيث وجدوا أن الأديبونكتين يزيد الحساسية على الأنسولين مسبباً إنقاص تراكم الشحوم في العضلات الهيكلية، من خلال تحفيز الأكسدة البائية للشحوم وبالتالي فإن عوز الأديبونكتين قد يلعب دوراً في تطور الداء السكري من النمط الثاني والتصلب العصيدي (12).
ارتبطت قيم الأديبونكتين سلبياً مع منسب كتلة الجسم، وهذا يتوافق مع دراسة Tsuchida وزملائه عام 2004 (13).
|
| الاستنتاج Conclusion |
|
إن مستويات الأديبونكتين تكون منخفضة لدى مرضى الداء السكري من النمط الثاني ومرضى الداء السكري من النمط الثاني مع مرض قلبي وعائي، مما يقترح دوراً محتملاً للأديبونكتين في الوقاية من الإصابة بالداء السكري من النمط الثاني.
|
| المراجع References |
1-Vague J.
The degree of masculine differentiation of obesities: A factor determining prediposition to diabetes, atherosclerosis, gout and uric calculous.
Am J Clin Nutr 4: 20-34, 1956.
2-Scherer et al.
Adiponectin is first named as Acrp30.
J Biological Chemistry 270: 26746-49, 1995.
3-Nakano et al.
Separated adiponectin from human plasma.
J Biochemistry 120(4): 803-812, 1996.
4-Maeda et al.
Separated adiponectin as collagen-like factor.
Biochemical and Biophysical Research Communications 221: 286-289, 1996.
5-Shapiro L. and Scherer E.P.
The crystal structure of a complement-1q family protein suggests evolutionary link to tumor necrosis factor.
Curr. Biol: 335-338, 1998.
6-Yokota T. et al.
Adiponectin, anew member of the family of soluble defense collagens, negatively regulates the growth of myelomonocytic progenitors
and the functions of macrophages.
Blood. 96: 1723-1732, 2000.
7-Kissebah A. et al.
quantitative trait loci on chromo-
somes 3 and 17 influence phenotypes of metabolic syndrome. Proc. Natl. Acad. Sci U.S.A 97:14478-14483, 2000.
8-Berg A.H. et al.
The adipocyte-secreted protein Acrp30 enhances hepatic insulin action.
Nat. Med 7: 947-953, 2001.
9-Yamauchi T. et al.
Adiponectin stimulates glucose utilization and fatty acid oxidation by activating AMP- activated protein kinase.
Nat. Med; 8: 1288-1295, 2005.
10-Yamauchi T. et al.
Globular adiponectin protected ob/ob mice from diabetes and ApoE-deficient mice from atherosclerosis.
J. Biol. Chem; 278: 2461-2468, 2006.
11-Tomas E. et al.
Enhanced muscle fat oxidation and glucose transport by ACRP30 globular domain: acetyl-CoA carboxylase inhibition and AMP-activated
protein kinase activation.
Proc. Natl. Acad. Sci; 16309-16313, 2004.
12-Lyon CJ; Law RE. and Hsueh WA.
Minireview: Adiposity, inflammation and atherosclerosis.
Endocrinology 144: 2195-2200, 2003.
13-Tsuchida A. et al.
Insulin/foxo1 pathway regulates expression levels of adiponectin receptors and adiponectin sensitivity.
J Biol Chem; 279: 30817-30822, 2004.
|
| |
