اختبار ضدي يُوَثِّقُ مَصْدوقِيَّة تشخيص قلة الصفيحات المحرض بالهيبارين
Antibody Test Validates Diagnosis of Heparin-Induced Thrombocytopenia
|
هناك مقايسة مناعية تمت المصادقة عليها لتشخيص قلة الصفيحات المحرض بالهيبارين (HIT) .Heparin-Induced Thrombocytopenia وهو النمط الأكثر أهمية وتكرارية من أنماط قلة الصفيحات الذي يحرضه الدواء وتتواسطه المناعة.
تعرف قلة الصفيحات بأنها انخفاض في تعداد الصفيحات بنسبة 30%على الأقل، وازدياد تعداد الصفيحات بعد التوقف عن تناول الهيبارين. ينخفض تعداد الصفيحات بعد 4-14 يوماً من تناول الهيبارين أو خلال 24-48 ساعة، إذا تم تناول الهيبارين مؤخراً (خلال 100 يوماً على الأقل)، بغض النظر عن الأسباب الرئيسية الأخرى المسببة لقلة الصفيحات.
تكشف مقايسة الممتز المناعي المرتبط بالإنزيم (ELISA) أضداد معقدات الهيبارين/ عامل الصفيحات 4 heparin/platelet factor 4 (PF4) في الدم. تترافق الأضداد مع النمط الثاني من الـ HIT التي تميز مواقع عامل الصفيحات 4 platelet factor 4 (PF4)، الذي يتولد عندما يتحد PF4 مع الهيبارين.
يغلل الطور الصلب لطبق المعايرة (ELISA) بـ PF4، ينصح باستخدام جرعة عالية من الهيبارين لتأكيد نوعية (ELISA). في هذه المقايسة الخاصة، إن تثبط نتائج (ELISA) الإيجابية بحوالي 50% أو أكثر بوجود زيادة من الهيبارين ( U/ml100) يعد تأكيداً على وجود الأضداد المعتمدة على الهيبارين.
ترتبط قيمة الكثافة الضوئية optical density (OD) للأضداد المضادة لـ heparin/ PF4 التي يكشف عنها بطريقة (ELISA) بكل من التشخيص السريري لـ HIT والتواتر العالي لقلة الصفيحات المحرض بالهيبارين والخثار. وبفضل تلك المقايسة التأكيدية تقدم زيادة الهيبارين قيمة إضافية في التشخيص المخبري لـ HIT فاحتمال كون الشخص إيجابي الـ HIT سريرياً يؤكد من خلال قيمة الكثافة الضوئية العالية لأضداد heparin/ PF4 ونتيجة المقايسة المؤكدة. وبهذا فالتنبؤات الدقيقة لاحتمال الإصابة بـ HIT ستمكن السريريين من البدء بإعطاء العلاج الملائم بسرعة وتقليل اختلاطات معالجة الـ HIT.
|
واصم حيوي يتنبأ عن الخثرات الدموية لدى مرضى السرطان
Biomarker Predicts Blood Clots in Cancer Patients
|
هنالك طراز تنبؤي لاختطار الانصمام الخثاري الوريدي (VTE) venous thromboembolism لدى مرضى السرطان. يتضمن الواصم الحيوي جزيئات P-selectin الذوابة (sP-selectin) soluble P-selectin .
يمكن مقايسة مستويات sP-selectin في البلازما الفقيرة بالصفيحات باستخدام مقايسة مناعية. الذي يعد أحد أفراد عائلة سيليكتينات جزيئات الالتصاق الخلوية ويوجد في حبيبات الصفيحات وأجسام Weibel-Palade في الخلايا البطانية. يُعبّر عنه على سطح الخلايا عند التفعيل ويتواسط التصاق الكريات البيضاء والصفيحات والخلايا السرطانية في الالتهاب والخثار ونمو السرطان والنقائل.
في دراسة تنبؤية أجريت مؤخراً في جامعة (Vienna, Austria) ما بين تشرين الأول October عام 2003 و كانون الأول December عام 2008، جرت فيها مقايسة مستويات sP-selectin لدى 819 مريض سرطان. كان 365 مريضاً مشخصاً لديهم خباثة حديثة و 322 مريضاً ممن لديهم خباثة بالأصل، لكنها تطورت بعد هدأة كاملة أو جزئية. كانت أنماط السرطان الدماغ والثدي والرئة والمعدة والقولون والمستقيم والبنكرياس والكلية والبروستات والخباثات الدموية كأورام النقي واللمفومات. جرت متابعة المرضى جميعهم خلال فترة وسيطة قدرها 415 يوماً. أظهرت نتائج الدراسة أنه يمكن تقسيم مرضى السرطان إلى مجموعات عالية الاختطار ومجموعات منخفضة الاختطار لتطور VTE. حيث كان احتمال حدوث VTE لدى مرضى الدراسة 5.5% بعد 6 أشهر، و6.8% بعد عام. كانت مستويات sP-selectin أعلى لدى مرضى السرطان اللذين لديهم VTE بفارق يعتد به إحصائياً، حيث كان متوسط مستويات sP-selectin (45.9 ng/mL). كما وجدت نتائج هذه الدراسة أن 7.2% من مرضى اللمفومات و 7.4% من مجموع مرضى الدراسة تطور لديهم VTE.
نظراً لأن اختطار VTE غير متساوٍ لدى مرضى السرطان جميعهم، ومنع تخثر الدم لديهم يؤدي إلى اختطارٍ عالٍ لاختلاطات النزوف، فتمييز مرضى السرطان وفقأ لاختطار VTE يعد أمراً هاماً جداً. وهذا الطراز الجديد يمكن أن يساعد السريريين على التفصيل المناسب للمعالجة المانعة للتخثر لتعزيز الوقاية من تخثر الدم، وتقليل اختلاطات النزوف.
|
استخدام الدم الجاف لتحري العَوَزٌ المَناعِيّ الوخيم لدى حديثي الولادة
Dried Blood Used to Screen Newborns for Severe Immunodeficiency
|
هناك اختبار جزيئي حساس جداً يطبق على بقع الدم الجافة لتشخيص العَوَزٌ المَناعِيّ المشترك الوخيم severe combined immunodeficiency (SCID) لدى حديثي الولادة.
تستخدم المقايسة تقنية التفاعل الكمي السلسلي للبوليميراز polymerase chain reaction (PCR) لقطع دوائر مستقبل الخلية التائية T-cell receptor excision circles (TREC)، التي هي عبارة نسخ من الـ DNA تنتج فقط من قبل الخلايا التائية. إذا كان تعداد TREC المحسوب أقل من 30 copies/µL فإنه يترافق مع SCID بحساسية 100% ونوعية 97%.
يمثل SCID مجموعة من الاضطرابات الخلقية النادرة لكنها تكون قاتلة أحياناً وتتميز باستجابة مناعية ضعيفة أو معدومة. الملامح المعروفة والشائعة لـ SCID مرض الولد الفقاعي bubble boy ، حيث يكون الخلل في الخلايا البيضاء المتخصصة (الخلايا اللمفاوية البائية والتائية).
أُجريت دراسة لتقييم أسلوب ثنائي الصف two-tiered approach، حيث جرى قياس interleukin IL-7 أولاً باستخدام طريقة ELISA، والذين يكون لديهم مستويات interleukin IL-7 مرتفعة تقاس لديهم TRECS الذي يحدث عند غياب الخلايا التائية. شملت هذه الدراسة 13 طفلاً لديهم SCID و183 مجهولي SCID. العيار الأول كان لـ interleukin IL-7 حيث كانت النوعية 96.1% والحساسية 85%، والعيار الثاني كان تعداد TRECS، حيث كانت النوعية 92.3% والحساسية بحدود 100%. كانت عينات الدم ماخوذة من الأطفال متوسط أعمارهم 4 أشهر، وكان تعداد اللمفاويات أقل مـن 2.8 x 109/L، وبلغت الحساسية 86% والنوعية 94% للتحري عن SCID. وفي دراسة أخرى للتحري عن SCID كان متوسط عمر الأطفال 84 يوماً، وكان تعداد اللمفاويات أقل من 5,000/Ml كانت الحساسية فقط 56% لكن كانت النوعية 100%.
خلافاً لاستخدام تعداد اللمفاويات الذي يتطلب الدم الكامل، فإن تطوير طريقة للتقصي عن SCID باستخدام بقع الدم الجافة سيعود بالفائدة للبدء بالتقصي عن SCID وفق البرنامج الحالي.
|
تحليل سُرْعَةُ تَثَفُّلِ الكُرَيَّاتِ الحُمْر أصبح أسهل وأسرع
Erythrocyte Sedimentation Rate Analysis
Made Easier and Faster
|
هنالك جهاز آلي يقيس سُرْعَ تَثَفُّلِ الكُرَيَّاتِ الحُمْر erythrocyte sedimentation rates (ESRs) بدقة كما أنه أسرع وأكثر انسجاماً من الطريقة اليدوية.
يمكن لهذه الأداة الآلية أن تمسح 10 أنابيب في كل مرة وتعطي نتائج ESRs بشكل دقيق خلال 30 دقيقة. حيث يستغرق ذلك ساعة كاملة مقارنة مع بطريقة Westergren. إذ تملأ أنابيب ESR المخلاة بـ 1.2 mL من الدم.
كما هو معلوم أن تحليل ESR اختبار تحري، غير نوعي، عن الالتهاب الناتج عن العديد من الحالات. فارتفاع قيمة ESR يمكن أن يكون إشارة إلى مرض مناعي ذاتي أو التهاب مفاصل أو فقر دم أو خمج أو خباثة و/ أو بعض الحالات الأخرى. وعلى الرغم من أن الطريقة اليدوية سهلة الإنجاز إلا أن هنالك العديد من العيوب التقنية مثل المزج غير الكافي أو الميلان أو الاهتزاز أثناء فترة الترسب.
يعطي جهاز Streck ESR-Auto Plus (Streck, Inc.; Omaha, NE, USA)، الآلي تماماً، نتائج موثوقة، كما أنه مدموجاً بنظام ضبط الجودة ويخلص من الحاجة للتحضير اليومي اليدوي.
تقدم أنابيب ESR المخلاة فوائد ثبات وأمان إضافية، إذ أنها تؤمن جمع الدم بالسحب المباشر وهذا يخلصنا من النقل غير الضروري لعينات المرضى، كما أنها مغطاة بنظام أمان Mylar المقاوم للصدمات الذي يحتوي الزجاج وعينات الدم في حال كسر الأنبوب.
|
مقايسة مناعية سريعة تستخدم لتشخيص ابيضاض الدم الحاد
Rapid Immunoassay Used to Diagnose Acute Leukemia
|
جرى تقييم مقايسة تألق مناعية immunofluorescence (IF) باستعمال أضداد وحيدة النسيلة لتشخيص ابْيِضاضُ السَّلائِفِ النِّقَوِيَّة الحادacute promyelocytic leukemia (APL) ، حيث يعد تشخيصه حاجة ملحة.
يعد APL نُمَيْط (تحت نمط) subtype من ابيضاض الدم النقوي الحاد acute myeloid leukemia (AML) الذي يتميز بإزفاء متبادل وتواتر عال للاعْتِلاَلٌ الخَثْرِيّ coagulopathy المهدد للحياة. مثلاً التفاعل السلسلي للبوليميراز باستخدام الناسخة العكسية reverse transcription-polymerase chain reaction (RT-PCR) لتشخيص ابْيِضاضُ السَّلائِفِ النِّقَوِيَّة promyelocytic leukemia (PML)– مستقبل حمض الريتونيئيك ألفا retinoic acid receptor (RAR) alph المندمج بالبروتينات الورمية تستهلك الكثير من الوقت، لذلك لا بد من وجود اختبار تشخيصي سريع ودقيق لـ APL. أجريت دراسة في كل المعاهد الهندية للعلوم الطبية لتقييم دور الأضداد وحيدة النسيلة PG-M3 باستخدام تقنية IF في التشخيص المبكر لـ APL. تتوجه أضداد PG-M3 مباشرة وبشكل نوعي باتجاه تسلسل ببتيدي يتوضع في النهاية الأمينية لبروتين PML البشري. شخصت 36 حالة APL جديدة غير معالجة بواسطة RT-PCR لـ PML-RAR alpha بوصفه المعيار الذهبي و 38 حالة شاهدة من غير المصابين بـ APL (28 non-APL AMLs and 10 non-leukemia samples) جرى اختبارها بالفحص المورفولوجي الروتيني والكيمياء النسيجية و RT-PCR و IF باستخدام الأضداد PG-M3 وحيدة النسيلة. كان متوسط عمر مرضى APL 35 عاماً ( المعدل 9-75 عاماً) وكانوا 19 رجلاً و 17 سيدة.
تستغرق مقايسة IF باستخدام PG-M3 antibodies ساعتين فقط. من أصل 36 حالة APL أظهرت 34 (94.4 %) حالة طرازاً حبيبياً دقيقاً microgranular pattern من IF وحالتين (5.6%) أظهرتا النموذج المنقط speckled pattern، إشارة إلى إمكانية السلبية الكاذبة. من أصل 28 من المجموعة الشاهدة non-APL AML أظهر 26 (92.9%) النموذج المنقط وحالتين (7.7%) أظهرتا النموذج الحبيبي الدقيق، إشارة إلى إمكانية السلبية الكاذبة. كانت تقنية IF أفضل وبشكل واضح مقارنة مع الفحص المورفولوجي وحده لتشخيص APL .
وفي النهاية، يمكن أن تستخدم PG-M3 antibodies كطريقة سهلة وسريعة ورخيصة وحساسة ونوعية لتشخيص APL، كما أنها يمكن أن تكون مساعداً مفيداً تشخيص APL خاصة عندعدم توفر متطلبات RT-PCR.
|
| |
