| المجلد 7 ,
العددان 9-10
, ربيع الثاني 1437 - كانون الثاني (يناير) 2016 |
| |
| علاقة مستويات MASP-2 المصليّة مع نوب قلة العدلات الحمويّة
لدى أطفال سوريين مصابين بابيضاض الدم اللمفاوي الحاد
|
| Association between Serum MASP-2 Levels and Febrile Neutropenic Attacks in Syrian Children with Acute Lymphoblastic Leukemia |
| د. راغب حرب و أ. د. جمانة الصالح |
| Harb R. and Saleh J. |
*كلية الصيدلة، جامعة دمشق
Faculty of Pharmacy, Damascus University
|
| الملخص Abstract |
ما تزال العداوى المرتبطة بالمعالجة الكيميائية سبباً للمراضة والوفيات. وتمثّل الحمّى وقلّة العدلات الوخيمة المحدثة بالمعالجة الكيميائية السبب الرئيسي لإدخال المستشفى اللامجَدْوَل Nonscheduled Hospital Admission. يمكن أن تمثّل المستويات المصلية المنخفضة لبروتياز السيرين المشارك لليكتين الرابط للمانوز-2 Mannose-binding lectin-Associated Serine Protease-2 (MASP-2) عامل اختطار لتطوير نوب قلة عدلات حموية Febrile Neutropenia (FN) لدى مرضى ابيضاض الدم مستقبلي المعالجة الكيميائية.
هدفت دراستنا إلى تقيم العلاقة بين المستويات المصلية لبروتياز السيرين المشارك لليكتين الرابط للمانوز-2 (MASP-2) ونوب قلّة العدلات الحمويّة (FN) لدى أطفال سوريين مصابين بإبيضاض الدم اللمفاوي الحاد (ALL) Acute Lymphoblastic Leukemia.
جرت الدراسة بين عامي 2013 و2014 في مستشفى الأطفال الجامعي بدمشق وشملت 37 طفلاً مشاركاً مصاباً بإبيضاض الدم اللمفاوي الحاد قبل البدء بالمعالجة الكيميائية، حيث تم حساب نوب قلّة العدلات الحمويّة من أضابير المرضى. وقيست مستويات بروتياز السيرين المشارك لليكتين الرابط للمانوز-2 (MASP-2) المصلية بطريقة الممتز المناعي المرتبط بالإنزيم (ELISA).
وبالنتيجة وُجِدَت علاقة عكسيّة بين عدد نوب قلّة العدلات الحمويّة ومستويات MASP-2 المصليّة، كما كان واضحاً أن المرضى الذين لديهم عوز في مستويات MASP-2 المصليّة تطور لديهم لاحقاً نوب FN أكثر من المرضى الذين لديهم مستويات MASP-2 مصليّة طبيعيّة.
|
Chemotherapy-related infections remain a major cause of morbidity and mortality, Fever and severe chemotherapy-induced neutropenia (FN) represents the main reason for nonscheduled hospital admission. Serum low levels of Mannose-binding lectin-Associated Serine Protease-2 (MASP-2) may presents a risk factor for developing febrile neutropenic attacks in patients of acute lymphoblastic leukemia who are candidates for chemotherapy.
Our study aimed to assess the relationship between serum MASP-2 levels and febrile neutropenic attacks in Syrian children with acute lymphoblastic leukemia (ALL).
The study has been done at Children University Hospital in Damascus between 2013-2014. This study included 37 children diagnosed with acute lymphoblastic leukemia (ALL) who were candidates for chemotherapy, and the values of febrile neutropenic attacks were calculated depending on patient's files.
The levels of Mannose-Binding Lectin-associated Serine Protease-2 (MASP-2) were measured by Enzyme Linked Immuno Sorbent Assay (ELISA).
As a result, there was found an important inverse relationship between Febrile Neutropenic attacks and serum MASP-2 levels, and it was clear that patients with MASP-2 deficiency developed more FN attacks than patients who have normal MASP-2 levels.
|
| المقدمة Introduction |
العدوى المرتبطة بالمعالجة الكيميائيّة هي سبب كبير للمراضة morbidity والوفيّات mortality. تُمثّل الحمّى وقلة العدلات الوخيمة المحدثة بالمعالجة الكيميائيّة السبب الرئيسي لإدخال المستشفى غيرالمُجَدْوَل (1، 2). وعلى الرغم من أن معظم المرضى يبدون قلة عدلات وخيمة مسببة بالمعالجة الكيميائية، فإن تواتر ووخامة قلة العدلات الحمويّة تتفاوت إلى حد بعيد بين مريض وآخر (3).
يُعد سبيل الليكتين الرابط للمانوز (MBL) Mannose-Binding Lectin عنصراً هاماً من المناعة الخلقيّة، ويتكون من مجموعة من البروتينات المصليّة والتي تُفعّل بدورها المتممة بُعيدَ التعرف على مكروبات متعددة. يتصرّف الليكتين الرابط للمانوز كمستقبلة مانان ذوابة soluble mannan receptor، وجرى استقصاء ذلك بالتفصيل (4)، إلا أن البروتينات المشاركة مثل L-ficolin وH-ficolin استُقصيت بشكل أقل (5،6). يعتمد كل من MBL والفيكولينات ficolins على بروتياز السيرين المشارك لليكتين الرابط للمانوز-2 (MASP-2) من أجل تفعيل جملة المتممة. بُعيدَ ارتباط معقدات MBL/MASP-2 إلى السطوح المكروبية، فإن MASP-2 يشطر C2 ثم C4، مشكلاً بذلك C3 convertase C4bC2b، الذي يؤدي في النهاية إلى طهاية وانحلال للعوامل المُمرضة مباشر وتوظيف الخلايا الالتهابية (7). وجرى حديثاً تحديد تعدد أشكال النوكليوتيد المفردsingle nucleotide polymorphism في جين MASP-2/MAp19 على الصبغي 1p36.2-3، مؤدياً بذلك إلى تراكيز MASP-2 مصلية منخفضة لدى الأفراد متغايري الزيجوت heterozygous (8)، لذا فإنَّ التراكيز المصليّة المنخفضة للـ MASP-2 يمكن أن تُمثّل عامل اختطار لدى مرضى ابيضاض الدم مستقبلي المعالجة الكيميائية (9).
تهدف هذه الدراسة إلى تقييم العلاقة بين مستويات MASP-2 المصليّة ونوب قلة العدلات الحمويّة Febrile Neutropenia، وإيجاد علاقة تساعد في تحديد المرضى الأطفال المصابين بابيضاض الدم اللمفاوي الحاد (ALL) ذوي الاختطار المرتفع لتطوير نوب قلة العدلات الحمويّة.
|
| المرضى والطرق Patients and Methods |
جرت المصادقة على البحث من قبل لجنة أخلاقيات البحث العلمي في جامعة دمشق. كما جرى ملء الموافقة المستنيرة من قبل أولياء أمر كل الأطفال المشاركين في البحث.
مجموعة الدراسة: شملت هذه الدراسة الاستباقية 37 مشاركاً، جميعهم أطفال مُصابوين بابيضاض الدم اللمفاوي الحاد (ALL) وذلك استناداً إلى نتيجة مقياس الجريان الخلوي Flowcytometry، جرى تصنيفهم حسب التصنيف المعتمد من قبل منظمة الصحة العالمية WHO، تتراوح أعمارهم بين 1 و14 عاماً، بمتوسط حسابي5.5 وانحراف معياري 2.5. تمَّ استبعاد المرضى الناكسين والمرضى المصابين بخباثات أخرى.
تمَّ جمع العينات لدى تشخيص إصابة المرضى بابيضاض الدم اللمفاوي الحاد (ALL)، قبل خضوعهم للمعالجة الكيميائية، وذلك من المراجعين لشعبة أمراض الدم في مستشفى الأطفال الجامعي بدمشق، حيث جُمِعَ 5 مل من الدم الوريدي من كل مريض، وجرى فصل المصل بالتنبيذ وبسرعة 3000 دورة/ دقيقة لمدة 10 دقائق، ثم حفظ المصل في درجة حرارة ℃80- حتى إجراء المعايرة.
|
| حساب حوادث قلة العدلات الحمويةFebrile Neutropenia |
جرى حساب حوادث قلة العدلات الحموية FN من أضابير المرضى.
إن قلة العدلات Neutropenia تعرف بانخفاض عدد
العدلات المطلق (ANC) <1500 خلية/ مكرولتر. يمكن حساب (ANC) من خلال الصيغة التالية:
ANC = عدد كريات الدم البيضاء (خلية/ مكرولتر) x (النسبة المئوية للعدلات + النسبة المئوية للأشرطة) ÷ 100
تُعرّف قلة العدلات لغايات تدبير أورام الأطفال الحموية febrile pediatric cancer patient، بأنها ANC<500 خلية/ مكرولتر أو ANC متوقع أنها ستنقُص حتى <500 خلية/ مكرولتر خلال الثماني والأربعين ساعة اللاحقة (10، 11).
تُعرّف حمى نقص العدلات بشكل عام لدى مرضى قلة العدلات بأنها درجة حرارة فموية مفردة ≤ 38ºC (ºF100.4) (12). كما يمكن أن تُعرّف الحمّى لدى هذه الشريحة من المرضى بأنها ارتفاع درجة الحرارة أكثر من 38ºC (ºF100.4) خلال ساعة واحدة أو ارتفاعين خلال فترة 12 ساعة (11، 13).
مقايسة مستويات MASP-2 المصلية
عويرت MASP-2 بطريقة المقايسة المناعية المرتبطة بالإنزيم Enzyme Linked Immuno Sorbent Assay (ELISA) بعتيدة لشركةSunRed الصينية، وأُجريت المعايرة حسب تعليمات الشركة المصنعة.
|
| التحليل الإحصائي Statistical Analysis |
| أجري التحليل الإحصائي باستخدام برنامج الحزمة الإحصائية SSPS (version 21, IBM SSPS). جرى التعبير عن مستويات MASP-2 المصلية باستخدام المتوسط الحسابي ± الانحراف المعياري، كما جرى تطبيق اختبار Spearman's rho للمقارنة بين تركيز مستوياتMASP-2 المصلية مع عدد FN. وجرى تطبيق اختبار Mann-Whitney U للمقارنة بين المتوسطات ولمعرفة إذا كان الفارق بين المجموعات جوهرياً أو ناتجاً عن الصدفة، كما اعتُمِدَت القيمة P<0.05 كونها تدل على قيمة إحصائية يُعتدّ بها. |
| النتائج Results |
يوضح الجدول 1 مقارنة مستويات MASP-2 المصلية مع عدد حوادث قلة العدلات الحموية (FN) لدى مرضى ابيضاض الدم اللمفاوي الحاد (ALL) المشاركين في الدراسة.
قمنا بتقييم 37 طفلاً (أعمارهم من 1-14 عاماً بمتوسط حسابي 5.1 وانحراف معياري 2.5) ومراقبتهم لمدة ستة أشهر بدون تسجيل أي حادثة وفاة. كان متوسط مستويات MASP-2 المصلية لديهم عند تشخيص الإصابة بابيضاض الدم اللمفاوي الحاد 509.03 351.8 ±نغ/مل، فكانت النتيجة كالتالي: المرضى الذين لم تتطور عندهم أي نوبة FN كان متوسط مستويات MASP-2 المصلية لديهم 1043.3 نغ/مل، أما المرضى الذين تطورت عندهم نوبة FN واحدة فكان متوسط مستويات MASP-2 المصلية لديهم 628.4 نغ/مل، والمرضى الذين تطورت عندهم نوبتا FN كان متوسط مستويات MASP-2 المصلية لديهم 506.9 نغ/مل، والمرضى اللذين تطورت عندهم 3 نوب FN كان متوسط مستويات MASP-2 المصلية لديهم 373.7 نغ/مل. والمرضى الذين تطور عندهم 4 نوب FN كان متوسط مستويات MASP-2 المصلية لديهم 164.3نغ/مل (الشكل 1).
يوضح الجدول 2 عدد نوب قلة العدلات الحموية (FN) حسب تصنيف المرضى إلى مرضى لديهم عوز في مستويات MASP-2 المصلية ( MASP-2<200 نغ/مل) ومرضى لديهم مستويات MASP-2 مصلية سوية (MASP-2>200 نغ/مل)، فكانت النتيجة أنه وُجِدَت 3.6 نوبة FN عند المرضى الذين لديهم عوز في مستويات MASP-2 المصلية، و1.8 نوبة FN عند المرضى اللذين لديهم مستويات MASP-2 مصلية سوية.
نلاحظ من الشكل 2 الارتفاع الملحوظ لحوادث قلة العدلات الحموية عند مرضى ابيضاض الدم اللمفاوي الحاد (ALL) الذين لديهم عوز في
مستويات MASP-2 المصلية مقارنة بأولئك الذين لديهم مستويات MASP-2 مصلية سوية، حيث أن هذا العوز يعرف بأنهMASP-2<200 نغ/مل، في حين أن المستويات الأكبر من 200 نغ/مل تعد سوية. وتجدر الإشارة إلى أن بروتياز السيرين المرافق لليكتين الرابط للمانوز-2 (MASP-2)، على عكس الليكتين الرابط للمانوز (MBL)، ليس مكون طور حاد، وبالتالي لا يرتفع أثناء العدوى (14، 15)، مما يدل على أن ارتفاعه ناجم عن الورم.
|
 |
| المناقشة Discussion |
هدفت دراستنا إلى تقيم العلاقة بين المستويات المصلية لبروتياز السيرين المشارك لليكتين الرابط للمانوز-2 (MASP-2) ونوب قلّة العدلات الحمويّة (FN) لدى أطفال سوريين مصابين بابيضاض الدم اللمفاوي الحاد acute (ALL) lymphoblastic leukemia. وعند تقييم هذه العلاقة أظهرت النتائج وجود علاقة عكسية هامة بين عدد نوبFN ومستويات MASP-2 المصلية (r= -0.832; P<0.0001). كما وُجِدَ أن المرضى الذين لديهم عوز في مستويات MASP-2 المصلية تطور لديهم لاحقاً نوب FN أكثر (بمقدار الضعف) من المرضى الذين لديهم مستويات MASP-2 مصلية سوية (P=0.001)، وهذا يعود إلى أن مستويات MASP-2 المصلية المنخفضة تؤدي إلى عدم كفاية في الارتباط بالليكتين الرابط للمانوز (MBL) والفيكولينات ficolins وبالتالي عدم تفعيل سبيل اللكتين في جملة المتممة، مما يؤدي إلى نقص في خط الدفاع الأول عند المضيف.
لا توجد أية دراسة تشير إلى أن العلاج الكيميائي بحد ذاته يؤثر على نوب قلة العدلات الحموية حتى تاريخه. توافقت دراستنا مع دراسة NAZARI وزملائه بأنه توجد علاقة عكسية بين نوب FN ومستويات MASP-2 المصلية (9).
بناءً على ما سبق فإنه يمكن استنتاج أن مستويات MASP-2 المصلية المنخفضة تمثّل عامل اختطار جديد لتطوير نوب قلة عدلات حمويّة (FN) لدى الأطفال المصابين بابيضاض الدم اللمفاوي الحاد مستقبلي المعالجة الكيميائية، وبالتالي اعتبارMASP-2 عامل إنذاري جديد يوصى بمقايسته عند تشخيص الإصابة بابيضاض الدم اللمفاوي الحاد لتحديد الأطفال الذين سوف يتطور عندهم لاحقاً نوب قلة عدلات حموية (FN).
|
| المراجع References |
1-Viscoli C; Varnier O. and Machetti M.
Infections in patients with febrile neutropenia: epidemiology, micro-biology, and risk stratification.
Clin Infect Dis. 2005, 40: S240-S245.
2-Walsh TJ; Roilides E; Groll AH; Gonzalez C. and Pizzo PA.
Infectiouscomplications in pediatric cancer patients. In: Pizzo PA. and Poplack DG.
eds. Principles and Practice of Pediatric
Oncology.5th ed. Philadelphia,
PA: Lippincott Williams & Wilkins;
2006, 1269-1329.
3-Neth OW; Bajaj-Elliott M; Turner MW.and Klein NJ.
Susceptibility toinfection in patients with neutropenia: the role of the innate immunesystem.
Br J Haematol, 2005, 129:713-722.
4-Takahashi K; Ip WE; Michelow IC.and Ezekowitz RA.
The mannosebindinglectin: a prototypic pattern recognition molecule.
Curr OpinImmunol.2006, 18: 16-23.
5-Matsushita M. and Fujita T.
The role of ficolins in innate immunity.
Immunobiology.2002, 205:490-497.
6-Kilpatrick DC; McLintock LA; Allan EK.et al.
No strong relationshipbetween mannan binding lectin or plasma ficolins and chemotherapyrelatedinfections.
Clin Exp Immunol. 2003,134: 279-284.
7-Sorensen R; Thiel S. and Jensenius JC.
Mannan binding lectin associated serine proteases, characteristics and disease associations.
Springer SeminImmunopathol.2005,27: 299-319.
8-Stengaard-Pedersen K;Thiel S; Gadjeva M. et al.
Inherited deficiency of mannan-binding lectin-associated serine protease 2.
N Engl J Med.2003, 349: 554-560.
9-Nazari S; Ebrahimi M; Abdollah Gorji F; Abadi A. and Fahimzad A.Association between Serum Levels of MASP-2 and Neutropenic Febrile Attacks in Children with Leukemia. Arch Iran Med. 2012, 15(10): 625-628.
10-Koh AY.and Pizzo PA.
Infections complications in pediatric cancer patients. In: Principles and Practice of Pediatric Oncology, 6th ed, Pizzo PA; Poplack DG (Eds), Lippincott Williams & Wilkins, Philadelphia 2011, p.1190.
11-Freifeld AG; Bow EJ; Sepkowitz KA.et al.
Clinical practice guideline for the use of antimicrobial agents in neutropenic patients with cancer: 2010 update by the infectious diseases society of america
Clin Infect Dis,2011, 52:e56.
12-Wolff LJ; Ablin AR; Altman AJ.andJohnson FL.
The management of fever. In: Supportive care of children with cancer: Current therapy and guidelines from the Children's Cancer Group, Ablin AR (Ed), Johns Hopkins University Press, Baltimore 1997, p.23.
13-Klaassen RJ; Goodman TR; Pham B. and Doyle JJ."Low-risk" Prediction rule for pediatric oncology patients presenting with fever and neutropenia.
J Clin Oncol,2000, 18:1012.
14-Thiel S; Holmskov U; Hviid L; Laursen SB. and Jensenius JC.
The concentration of the C-type lectin, mannan-binding protein, in human plasma increases during an acute phase response.
Clin Exp Immunol.1992, 90:31-35.
15-Herpers BL; Endeman H; de Jong BA; de Jongh BM; Grutters JC;Biesma DH.and van Velzen-Blad H.
Acute-phase responsiveness of mannose binding lectin in community-acquired pneumonia is highly dependent upon MBL2 genotypes.
Clin Exp Immunol.2009;156:488-494.
|
| |
| المجلد 7 ,
العددان 9-10
, ربيع الثاني 1437 - كانون الثاني (يناير) 2016 |
|
|
|
