بحث في أعداد المجلة الجملة   المؤلف

المجلد 7 , العددان 9-10 , ربيع الثاني 1437 - كانون الثاني (يناير) 2016   مستويات الليبتين لدى مريضات متلازمة المبيض متعدد الكيسات وقدرتها على التنبؤ بنتائج عملية الإخصاب في المختبر  Leptin Levels in Women with Polycystic Ovary Syndrome and its Ability to Predict in Vitro Fertilization Outcomes د. ماري قدسي1، أ. د. مروان الحلبي2، وأ. د. فايزة القبيلي1 Kudsy M1; Alhalabi M2. and Al-Quobaili F1. 1كلية الصيدلة، 2كلية الطب، جامعة دمشق 1Faculty of Pharmacy, 2Faculty of Medicine, Damascus University الملخص Abstract متلازمة المبيض متعدد الكيسات (PCOS) هي سبب رئيسي للعقم الناجم عن خلل الإباضة لدى النساء في سن الإنجاب. وعلى الرغم من أن إمراضية الـ PCOS ما تزال غير واضحة حتى الآن، إلا أن بعض الدراسات أظهرت أن الليبتين يلعب دوراّ في إمراضية هذه المتلازمة وأن مستويات الليبتين في المصل والسائل الجريبي قد يكون لها القدرة على التنبؤ بنتيجة عملية الإخصاب في المختبر (IVF) لدى مريضات الـ PCOS. هدفت هذه الدراسة إلى تعيين مستويات الليبتين في المصل وفي السائل الجريبي (FF) لدى مريضات متلازمة المبيض متعدد الكيسات (PCOS)، وإلى تقييم فائدة مستويات الليبتين في المصل والسائل الجريبي كمتنبئات لنتيجةالـ IVF لدى مريضات الـ PCOS. وتصميم الدراسة هو من نمط دراسة حالة- شاهد. شملت هذه الدراسة 40 مريضة مصابة بمتلازمة المبيض متعدد الكيسات و40 من النساء الشواهد المماثلات لهن في الوزن والعمر. خضعن جميعهن لعملية الإخصاب في المختبر (IVF). جرى جمع عينات الدم والسائل الجريبي للأفراد جميعهن يوم استرجاع الخلايا البيضية. قيست مستويات الليبتين في المصل والـ FF بطريقة المُمْتَزِّ المَناعِيِّ المُرْتَبِطِ بالإِنْزِيْم ELISA. إن مستويات الليبتين المصلية لم تختلف بين مريضات الـ PCOS والمجموعة الشاهدة (23.95 ±11.26 نغ/مل، 22.27±11.75 نغ/مل، على الترتيب، 4p=0.51)، كذلك لم تختلف مستويات الليبتين في السائل الجريبي بين مريضات الـ PCOS والمجموعة الشاهدة (48.39±12.12 نغ/مل، 43.27±13.19 نغ/مل، على الترتيب، 4p=0.07). ارتبطت مستويات الليبتين في المصل والـ FF ارتباطاً إيجابياً مع الـ BMI (P<0.05) .ولم ترتبط مستويات الليبتين في المصل و الـ FF مع أي من نتائج الـ IVF (P>0.05). لم تختلف مستويات الليبتين المصلية بين النساء الحوامل وغير الحوامل لدى كل من مريضات الـ PCOS (27.11±9.46 نغ/مل، 23.97±13.06 نغ/مل، على الترتيب، P=0.474) والمجموعة الشاهدة (20.15±13.81 نغ/مل، 21.57±8.08 نغ/مل، على الترتيب، P=0.743)، كما لم تختلف مستويات الليبتين في الـ FF بين النساء الحوامل وغير الحوامل لدى كل من مريضات الـ PCOS (50.88±9.57 نغ/مل، 48.71±12 نغ/مل، على الترتيب، P=0.606) والمجموعة الشاهدة (39.62±13.14 نغ/مل، 43.99±11.47 نغ/مل، على الترتيب، P=0.344). وكاستنتاج، لم تختلف مستويات الليبتين في المصل والسائل الجريبي بين مريضات الـ PCOS والمجموعة الشاهدة، في حين ارتبطت هذه المستويات ارتباطاً إيجابياً مع الـ BMI. لهذا فالتبدلات في مستويات الليبتين ترتبط بشكل أساسي بوزن الجسم وليس لها علاقة بمتلازمة المبيض متعدد الكيسات. وأيضاً لا يمكن استخدام مستويات الليبتين في المصل أو الـ FF للتنبؤ بنتيجة الإخصاب في المختبر ((IVF.   Polycystic ovarian syndrome (PCOS) is a major cause of dysovulatory infertility in women of reproductive age. Although the pathogenesis of PCOS remains unclear till now, some studies reported that leptin plays a role in the pathogenesis of this syndrome, and that serum and follicular fluid leptin levels may have the ability to predict in vitro fertilization (IVF) outcome in PCOS patients. This study aimed to determine the levels of leptin in the serum, as well as, in the follicular fluid (FF) of polycystic ovary syndrome (PCOS) patients, and to evaluate the benefit of serum and follicular fluid leptin levels as predictors for IVF outcome in PCOS patients. The study design is Case- control study. 40 patients with polycystic ovary syndrome and 40 age and weight matched control women were included in this study. All of them enrolled in the in vitro fertilization (IVF) program. Blood and FF samples were collected from all subjects on the day of oocyte retrieval. Leptin levels were measured in serum and FF using enzyme linked immunosorbent assay (ELISA). Serum leptin levels did not differ between PCOS patients and control group (23.95±11.26 ng/ml, 22.27±11.75 ng/ml, respectively, p=0.514), also Follicular Fluid leptin levels did not differ between PCOS patients and control group (48.39±12.12 ng/ml, 43.27±13.19 ng/ml, respectively, p=0.074). Serum and FF leptin levels were positively correlated with BMI (P<0.05). Both serum and FF leptin levels were not significantly correlated to any of the IVF outcomes (P>0.05). Serum leptin levels did not differ between pregnant and non-pregnant women in both PCOS patients (27.11±9.46 ng/ml, 23.97±13.06 ng/ml, respectively, p=0.474) and control group (20.15±13.81 ng/ml, 21.57±8.08 ng/ml, respectively, p=0.743), and FF leptin levels did not differ between pregnant and non-pregnant women in both PCOS (50.88±9.57 ng/ml, 48.71±12 ng/ml, respectively, p=0.606) and control women (39.62±13.14 ng/ml, 43.99±11.47 ng/ml, respectively, p=0.344). As conclusion, There is no difference in serum and Follicular fluid leptin levels between PCOS patients and control group, whereas these levels are positively correlated with BMI. Thus, changes in leptin levels are mainly related to body weight and have no correlation to polycystic ovary syndrome. Also, serum and FF leptin levels couldn’t be used as predictors for in vitro fertilization (IVF) outcome.   المقدمة Introduction  تعد متلازمة المبيض متعدد الكيسات (PCOS) Polycystic Ovary Syndrome واحدة من الاضطرابات الصماوية الأكثر شيوعاً، كما أنها واحدة من الأسباب الأكثر شيوعاً للعقم الناجم عن غياب الإباضة لدى النساء في سن الإنجاب (1)، حيث يقدر أن 90-95% من النساء المراجعات لعيادات العقم بسبب غياب الإباضة يعانين من الـ PCOS (2). يجري تشخيص متلازمة المبيض متعدد الكيسات PCOS اعتماداً على معايير روتردام 2003 التي تعتمد على وجود اثنين على الأقل من المعايير الثلاثة التالية: علامات فرط الأندروجينية (علامات سريرية أو مخبرية كيميائية حيوية)، ندرة أو غياب الإباضة، مظهر مبيض متعدد الكيسات بالأمواج فوق الصوتية. مع استبعاد وجود اعتلال صماوي آخر (3). ترتبط متلازمة المبيض متعدد الكيسات أيضاً مع الاضطرابات الأيضية مثل البدانة ومقاومة الأنسولين (4)، حيث تحدث البدانة لدى حوالى نصف المصابات بمتلازمة المبيض متعدد الكيسات (5)، بينما توجد مقاومة الأنسولين لدى حوالي 50-70% من مريضات الـ PCOS وبشكل مستقل عن البدانة (2). ونظراً للارتباط المعروف بين الليبتين والبدانة وعمل الأنسولين، فمن الممكن أن نفترض أن الليبتين يلعب دوراً في إمراضية الـ PCOS (6). الليبتين عبارة عن بروتين مؤلف من 167 حمضاً أمينياً، يفرز بشكل رئيسي من الأنسجة الشحمية، ويجري التعبير عنه أيضاً في العديد من الأنسجة الأخرى بما فيها المبيض 7)). تبرز تأثيرات الليبتين عن طريق ارتباطه بمستقبلات نوعية ObRs يجري التعبير عنها في الدماغ والأنسجة المحيطية أهمها ObRa، الذي يلعب دوراً هاماً في نقل الليبتين عبر الحاجز الدموي الدماغي والـ ObRb الذي يتواسط تنبيغ (تحاسّ) إشارة الليبتين ويعبر عنه بقوة في منطقة الوطاء (8). يشارك الليبتين في تنظيم استتباب الطاقة وفي العديد من الوظائف العصبية الصماوية، كما يلعب دوراً في تنظيم الحساسية للأنسولين وفي الوظيفة المناعية (8(. أما بالنسبة لدوره في متلازمة المبيض متعدد الكيسات، فلقد خضع إلى جدل عميق مع وجود وجهات نظر متعارضة في ما يتعلق بمشاركته الحقيقية في هذه المتلازمة، فبعض الدراسات أظهرت ارتفاعاً في مستويات الليبتين المصلية والجريبية لدى مريضات الـ PCOS (1)، وبيّنت أن زيادة تراكيز الليبتين في المصل أو السائل الجريبي يمكن أن تضعف جودة الجنين ومعدلات الحمل (1، 9)، في حين أظهرت دراسات أخرى أن ليبتين السائل الجريبي ينخفض لدى مريضات الـ PCOS (10) وأنه واصم غير مفيد لجودة البويضات أو الإخصاب أو تطور الجنين 11)). وبالتالي فإن اشتراك الليبتين وأهميته في الفيزيولوجيا المرضية للـ PCOS وخاصة تأثيره على كفاءة نضج البويضات يحتاج إلى مزيد من التوضيح. لذا هدفت دراستنا إلى تقييم العلاقة بين مستويات الليبتين في المصل والسائل الجريبي والإصابة بمتلازمة المبيض متعدد الكيسات وإلى تقييم فائدة مستويات الليبتين المصلية والجريبية في التنبؤ بنتائج عملية الإخصاب في المختبر.   المواد والطرق Materials and Methods  مجموعات الدراسة: شملت الدراسة 80 سيدة، تراوحت أعمارهن بين 18 و38 عاماً، كلهن خاضعات لعملية الإخصاب في المختبر (IVF). جرى جمع عينات المصل والسائل الجريبي لهن بين تشرين الأول 2012 وأيلول 2013 من مستشفى متخصص بالعقم وطفل الأنبوب (مستشفى الشرق في دمشق). وزّعت مجموعات الدراسة وفق مايلي: المجموعة الشاهدة: شملت 40 أنثى، لديهن إباضة سوية، وكان سبب إجراء عملية الإخصاب في المختبر لديهن هو العامل الذكري. المجموعة المرضية: شملت 40 مريضة مصابة بمتلازمة المبيض متعدد الكيسات، وقد شخصت المريضات وفقاً لمعايير روتردام 2003. جرى استبعاد: النساء اللاتي تجاوزت أعمارهن 38 عاماً. النساء الخاضعات لأكثر من تجربة IVF فاشلة. النساء المصابات بالداء السكري. النساء المصابات بآفات تؤثر على الانغراس والحمل مثل الانتباذ البطاني الرحمي والأورام الليفية الرحمية وموه البوق وسلائل باطن الرحم وغيرها. إن المجموعة الشاهدة متماثلة من حيث العمر مع المجموعة المرضية (متوسط العمر±الانحراف المعياري: 28.4±5.9 عاماً، 28.6±4.3 عاماً، على الترتيب). جرت مقايسة مستويات الليبتين المصلية والجريبية لدى كل من المجموعة المرضية والشاهدة يوم استرجاع الخلايا البيضية. تطبيق مُرتسم فرط تحريض الإباضة المراقب على أفراد الدراسة اتبعت المريضات البروتوكول الطويل لفرط التنبيه المراقب للمبيض والذي بدأ باستخدام مانعات الحمل الفموية في اليوم الثالث أو الخامس من الدورة الطمثية واستكمل بتثبيط النخامية بوساطة مضاهئات الهرمون المطلق لموجهة الغدد التناسلية (Buserelin GnRH) في منتصف الطور اللوتيني (اليوم 21 للدورة) والذي استمر إعطاؤه يومياً حتى يوم إعطاء موجهات الغدد التناسلية المشيمائية البشريةHuman chorionic gonadotropin (hCG). وفي اليوم الثالث من الدورة الطمثية الجديدة، جرى حقن المريضات بالهرمون المنبه للجريب المأشوب rFSHGonal-F 75 IU, Sereno, Switzerland)) أو بموجهات الغدد التناسلية الإياسية البشريةHuman menopausal gonadotropin (hMG) وجرى ضبط الجرعة تبعاً لاستجابة المريضات. جرت مراقبة نمو الجريبات بالأمواج فوق الصوتية (المجس المهبلي)، وعندما أصبح قطر ثلاثة جريبات على الأقل أكبر من 17 مم (بعد حوالي 9-11 يوماً من حقن الـ rFSH أو الـ hMG) جرى إعطاء المريضات 10000 IU من موجهة الغدد التناسلية المشيمائية البشرية hCG (Pregnyl, Organon) أو من موجهة الغدد التناسلية المشيمائية البشرية المأشوبة recombinant human chorionic (rhCG) gonadotropin (Ovitrelle)، ثم جرى بزل البيوض (Egg retrieval) بعد 35 ساعة من إعطاء الـ hCG أو الـ rhCG، وجرت مراقبة الإلقاح في اليوم الثاني ونقلت الأجنة بعد ثلاثة أيام من بزل البيوض. الاعتيان جُمِع 4-5 مل دم من كل أفراد الدراسة ضمن أنابيب جافة يوم استرجاع الخلايا البيضية. نبّذت العينات لمدة 10 دقائق بسرعة 3000 x g وبدرجة حرارة الغرفة. حفظت المصول ضمن أنابيب ايبندورف في الدرجة-80°C إلى حين إجراء المقايسة. جرى أيضاً جمع عينات السائل الجريبي من كل أفراد الدراسة يوم استرجاع الخلايا البيضية، حيث جرى بزل السائل الجريبي من كل الجريبات التي يبلغ قطرها <14 مم، وبعد عزل الخلايا البيضية، نبّذت عينات السائل الجريبي بسرعة 3000 x g لمدة 10 دقائق بدرجة حرارة الغرفة. حفظت العينات ضمن أنابيب ايبندورف في الدرجة80- °C إلى حين إجراء المقايسة. الطرق المستخدمة جرت مقايسة الليبتين باستخدام عتيدة Human Leptin ELISA المصنعة من قبل شركة Koma Biotech Inc.Korea، حيث جرى قياس الامتصاص بموجة طولها450 نانومتر، باستخدام جهاز TECAN Sunrise TM, Switzerland)). واستخدمت سلسلة معياريات الليبتين لرسم المنحنى المعياري للامتصاص مقابل تراكيز الليبتين، والذي استخدم لحساب تراكيز الليبتين في العينات. جرى حساب منسب كتلة الجسم Body (BMI) Mass Index لأفراد الدراسة جميعهن من خلال تقسيم وزن المريضة بالكغ على مربع طولها بالمتر. الدراسة الإحصائية جرى التعبيرعن قيم للواصمات المقاسة بالمتوسط الحسابي والانحراف المعياري. اعتمد اختبار student's t-test لتحديد ما إذا كان الفارق بين المتوسطات ناجماً عن المصادفة أم حقيقياً، واعتمدت قيمة p-value<0.05 قيمة معتد بها إحصائياً. اعتمد معامل الارتباط pearson لدراسة علاقة الارتباط لدى متثابتات المجموعة الواحدة، واعتمدت قيمة p-value<0.05 قيمة معتد بها إحصائياً. وأجريت الحسابات الإحصائية للبحث باستخدام برنامج SPSS الإصدار 13.   النتائج Results  دراسة قيم منسب كتلة الجسم BMI لدى مريضات الـ PCOS مقارنة بالمجموعة الشاهدة لم تكن هنالك فروقات معتداً بها إحصائياً في متوسط قيم منسب كتلة الجسم BMI بين مريضات الـ PCOS والمجموعة الشاهدة (p = 0.331) (الجدول 1). دراسة مستويات الليبتين المصلية لدى مريضات الـ PCOS مقارنة بالمجموعة الشاهدة أظهرت النتائج عدم وجود فروقات يُعتد بها في مستويات الليبتين المصلية بين مريضات الـ PCOS والمجموعة الشاهدة (p= 0.514) (الشكل 1). دراسة مستويات الليبتين الجريبية لدى مريضات الـ PCOS مقارنة بالمجموعة الشاهدة أظهرت النتائج عدم وجود فروقات يُعتد بها في مستويات الليبتين الجريبية بين مريضات الـ PCOS والمجموعة الشاهدة (P = 0.074) (الشكل 2). دراسة العلاقة بين مستويات الليبتين المصلية ومنسب كتلة الجسم (BMI) لدى كل من مريضات الـ PCOS والمجموعة الشاهدة وجدت علاقة ارتباط إيجابية معتد بها إحصائياً بين مستويات الليبتين المصلية والـ BMI لدى كل من مريضات الـ PCOS والمجموعة الشاهدة (r = 0.588، p = 0.0001؛r = 0.541، p = 0.0001، على الترتيب) (الشكل 3). دراسة العلاقة بين مستويات الليبتين الجريبية ومنسب كتلة الجسم (BMI) لدى كل من مريضات الـ PCOS والمجموعة الشاهدة وجدت علاقة ارتباط إيجابية معتد بها إحصائياً بين مستويات الليبتين الجريبية والـ BMI لدى كل من مريضات الـ PCOS والمجموعة الشاهدة (r = 0.467، p = 0.002؛r = 0.596، p = 0.0001، على الترتيب). دراسة العلاقة بين مستويات الليبتين وكل من متغيرات الإخصاب المدروسة لدى مريضات الـ PCOS والمجموعة الشاهدة إن مستويات الليبتين في المصل أو السائل الجريبي لم ترتبط مع أي من متغيرات الإخصاب المدروسة لدى كل من مريضات الـ PCOS والمجموعة الشاهدة (الجدول 2). دراسة العلاقة بين مستويات الليبتين وحدوث الحمل لدى كل من مريضات الـ PCOS والمجموعةالشاهدة إن مستويات الليبتين في المصل أو في السائل الجريبي لم ترتبط بأي من حالات حدوث الحمل أو عدم حدوثه (الجدول 3).     المناقشة Discussion  بينت نتائجنا عدم وجود فروقات معتد بها إحصائياً في مستويات الليبتين المصلية بين مريضات الـPCOS والمجموعة الشاهدة. ولقد توافقت نتائجنا مع نتائج Plati وزملائه عام2010(10) وMantzoros وزملائه عام 2000 (12) واللذين وجدا أن مستويات الليبتين في المصل لم تختلف بين مريضات الـ PCOS والشواهد المماثلات لهن في الوزن والعمر. ويمكن تفسير ذلك بأن تراكيز الليبتين الدورانية تعود بشكل أساسي إلى دهون الجسم الكلية لدى كل من مريضات الـ PCOS والشواهد. بينما تعارضت نتائجنا مع نتائج دراسة Li وزملائه عام2007 (1) والتي وجدت أن مستويات الليبتين المصلية تكون أعلى لدى النساء المصابات بالـ PCOS مقارنة مع الشواهد.   أيضاً لم تكن هنالك فروقات معتد بها إحصائياً في مستويات الليبتين الجريبية بين مريضات الـ PCOS والمجموعة الشاهدة. وتوافقت نتائجنا مع دراسة Mantzoros وزملائه عام2000 (12) والتي أظهرت أنه بعد ضبط العمر والـ BMI لم يكن هنالك اختلاف في تراكيز الليبتين الجريبية بين مريضات الـPCOS والمجموعة الشاهدة، أي أن ارتفاع الليبتين في السائل الجريبي لدى مريضات الـ PCOS يعود إلى ارتفاع الـ BMI لدى المريضات. وتعارضت نتائجنا مع Plati وزملائه عام 2010 (10) وGarruti وزملائه عام 2014 (13) واللذين وجدا أن مستويات الليبتين الجريبية تكون أقل لدى النساء المصابات بالـ PCOS مقارنة مع الشواهد. وتعارضت أيضاً مع دراسة Li وزملائه عام2007 (1) والتي وجدت أن مستويات الليبتين الجريبية تكون أعلى لدى النساء المصابات بالـ PCOS. فإلى الآن هنالك اختلاف بين الدراسات في ما يتعلق بتراكيز الليبتين الجريبية بين مريضات الـ PCOS والشواهد، وحتى الآن لم يعز أي دور نهائي لليبتين في الفيزيولوجيا المرضية لمتلازمة المبيض متعدد الكيسات. ارتبطت مستويات الليبتين المصلية والجريبية ارتباطاً إيجابياً مع منسب كتلة الجسم BMI لدى مريضات الـ PCOS والشواهد. وتوافقت دراستنا مع دراسات Plati وزملائه عام 2010 (10) وGarruti وزملائه عام 2014 (13) وNikolettos وزملائه عام 2004 (14) والذين وجدوا أن تراكيز الليبتين في المصل والسائل الجريبي ترتبط ارتباطاً إيجابياً مع الـ BMI. ويمكن أن يفسر هذا الارتفاع في تركيز الليبتين مع ارتفاع الـ BMI من خلال حقيقة أن الليبتين يفرز بشكل رئيسي من الخلايا الشحمية وتراكيزه تعكس دهون الجسم الكلية. إلا أن مستويات الليبتين المصلية أو الجريبية لم ترتبط مع أي من نتائج الإخصاب في المختبر أو مع حدوث الحمل. وتوافقت نتائجنا مع نتائج Almog وزملائه عام 2011 (15) ومع Asimakopoulos وزملائه عام 2009 (16) ونتائج Dorn وزملائه عام 2003 (17) والذين وجدوا أن مستويات الليبتين في المصل أو السائل الجريبي لا ترتبط مع واصمات نتيجة الإخصاب في المختبر أو مع معدل الحمل. في حين تعارضت نتائجنا مع نتائج Asimakopoulos وزملائه عام 2005 (18)، والذي وجد أن مستويات الليبتين في السائل الجريبي ترتبط عكساً مع نتيجة الحمل في دورات الـ IVF، وتعارضت أيضاً مع Li وزملائه عام 2007 (1)، والذي وجد أن ارتفاع مستويات الليبتين في المصل والسائل الجريبي تترافق مع فشل عملية الإخصاب في المختبر. يمكن أن يعود سبب هذا الاختلاف في النتائج إلى اختلاف حجم العينة، حيث أن دراسة Asimakopoulos وزملائه عام 2005 (18) أُجريت على 17 مريضة فقط، في حين كان حجم العينة في دراستنا 80 مريضة، أيضاً قد يكون سبب الاختلاف هو أنه في دراستنا قمنا بفحص جميعة السائل الجريبي النظيف، بينما في دراسة Li وزملائه عام 2007 (1) اُعتمد على استخدام عينة من جريب واحد لتمثل باقي الجريبات ومستويات الليبتين في جريب واحد ويمكن أن لا تعبر بدقة عن مستويات الليبتين في بقية الجريبات.   الاستنتاج Conclusion  إن مستويات الليبتين المصلية والجريبية لا تختلف بين مريضات الـ PCOS والمجموعة الشاهدة المطابقة لها في الوزن والعمر، بينما ترتبط هذه مستويات ارتباطاً إيجابياً مع الـ BMI، فالتبدلات في تراكيز الليبتين تعود بشكل أساسي إلى وزن الجسم سواء لدى مريضات الـ PCOS أو المجموعة الشاهدة وليس لها علاقة بالإصابة بمتلازمة المبيض متعدد الكيسات. كما أن هذه المستويات لم ترتبط بنتائج الإخصاب في المختبر لدى مجموعة مريضات الـ PCOS والمجموعة الشاهدة. لهذا فإنه لا يمكن اعتماد مستويات الليبتين المصلية أو الجريبية للتنبؤ بنتائج عملية الإخصاب في المختبر.  المراجع References:  1-Li M.G; Ding G.L; Chen X.J; Lu X.P; Dong L.J; Dong M.Y; Yang X.F; Lu X.E. and Huang H.F. Association of serum and follicular fluid leptin concentrations with granulosa cell phosphorylated signal transducer and activator of transcription 3 expression in fertile patients with polycystic ovarian syndrome. J Clin Endocrinol Metab, 92 (12): 4771-4776, 2007. 2-Sirmans S.M. and Pate K.A. Epidemiology, diagnosis, and management of polycystic ovary syndrome. Clin Epidemiol, 6: 1-13, 2013. 3-Goodarzi M.O; Dumesic D.A; Chazenbalk G. and Azziz R. Polycystic ovary syndrome: etiology, pathogenesis and diagnosis. Nat Rev Endocrinol, 7(4): 219-231, 2011. 4-Teede HJ; Hutchison S; Zoungas S.and Meyer C. Insulin resistance, the metabolic syndrome, diabetes, and cardiovascular disease risk in women with PCOS. Endocrine, 30(1): 45-53, 2006. 5-Rojas J; Chaves M; Olivar L; Rojas M; Morillo J; Mejias J; Calvo M. and Bermudez V. Polycystic ovary syndrome, insulin resistance, and obesity: navigating the pathophysiologic labyrinth. Int J Reprod Med, 2014: 1-17, 2014. 6-Chakrabarti J. Serum leptin level in women with polycystic ovary syndrome: correlation with adiposity, insulin, and circulating testosterone. Ann Med Health Sci Res, 3(2): 191-196, 2013. 7-Mantzoros C.S; Magkos F; Brinkoetter M; Sienkiewicz E; Dardeno T.A; Kim S.Y; Hamnvik O.P.R. and Koniaris A. Leptin in human physiology and pathophysiology. Am J Physiol Endocrinol Metab, 301(4): E567–E584, 2011. 8-Kelesidis T; Kelesidis I; Chou S. and Mantzoros C.S. Narrative review: the role of leptin in human physiology: emerging clinical applications. Ann Intern Med, 152 (2): 93-100, 2010. 9-Anifandis G; Koutselini E; Stefanidis I;LiakopoulosV; Leivaditis C;MantzavinoS T. and Vamvakopoulos N. Serum and follicular fluid leptin levels are correlated with human embryo quality. Reproduction, 130(6): 917-921, 2005. 10-Plati E; Kouskouni E; Malamitsi-Puchner A; Boutsikou M; Kaparos G. and Baka S. Visfatin and leptin levels in women with polycystic ovaries undergoing ovarian stimulation. Fertil Steril, 94 (4): 1451-1456, 2010. 11-Welt C.K; Schneyer A.L; Heist K. andMantzoros C.S. Leptin and soluble leptin receptor infollicular fluid. J Assist Reprod Genet, 20(12): 495-501, 2003. 12-Mantzoros C.S; Cramer D.W; Liberman R.F.and Barbieri R.L. Predictive value of serum and follicular fluid leptin concentrations during assisted reproductive cycles in normal women and in women with the polycystic ovarian syndrome. Hum Reprod, 15 (3): 539-544, 2000. 13-Garruti G; de Palo R; Rotelli M.T; Nocera S; Totaro I; Nardelli C; Panzarino M.A; Vacca M; Selvaggi L.E. and Giorgino F. Association between follicular fluid leptin and serum insulin levels in nonoverweight women with polycystic ovary syndrome. Biomed Res Int. 2014: 1-7, 2014. 14-Nikolettos N; Asimakopoulos B; Nicolettos N; Efthimiadou A;Mourvati E. and Demirel C. Evaluation of leptin, interleukin-1beta, tumor necrosis factor-alpha and vascular endothelial growth factor in serum and follicular fluids of women undergoing controlled ovarian hyperstimulation as prognostic markers of ICSI outcome. In Vivo, 18 (5): 667-673, 2004. 15-Almog B; Azem F; Kapustiansky R;Azolai J; Wagman I; Levin I; Hauser R;Pauzner D; Lessing J.B; Amit A. and Gamzu R. Intrafollicular and serum levels of leptin during in vitro fertilization cycles: comparison between the effects of recombinant follicle-stimulating hormones and human menopausal gonadotrophin. Gynecol Endocrinol, 27 (9): 666-668, 2011. 16-Asimakopoulos B; Koster F; Felberbaum R; Tripsiannis G; Caglar G.S; Nikolettos N; Al-Hasani S. and Diedrich K. Intrafollicular and circulating concentrations of leptin do not predict the outcome in IVF-ICSI cycles. Reprod Sci, 16 (1): 113-119, 2009. 17-Dorn C; Reinsberg J; Kupka M; van der Ven H. and Schild RL. Leptin, VEGF, IGF-1 and IGFBP-3 concentrations in serum and follicular fluid of women undergoing in vitro fertilization. Arch Gynecol Obstet, 268 (3):187-193, 2003. 18-Asimakopoulos B; Nikolettos N; Papachristou D.N; Simopoulou M; Al-Hasani S. and Diedrich K. Follicular fluid levels of vascular endothelial growth factor and leptin are associated with pregnancy outcome of normal women participating in intracytoplasmic sperm injection cycles. Physiol Res, 54(3): 263-270, 2005.     المجلد 7 , العددان 9-10 , ربيع الثاني 1437 - كانون الثاني (يناير) 2016 SCLA