| المجلد 8 , العدد 3-4 , ربيع الثاني 1438 - كانون الثاني (يناير) 2017 |
| |
| تقييم تراكيز TNF-αالمصلية لدى مريضات سرطان ثدي سوريات |
| Assessment of Serum TNF-alpha Concentrations
in Syrian Breast Cancer Patients
|
| أ.د. جمانة الصالح |
| Jumana S. Salh |
| كلية الصيدلة، جامعة دمشق
Faculty of Pharmacy, Damascus University
|
| الملخص Abstract |
| يعد عامِلُ نَخَرِ الوَرَم ألفا tumor necrosis factor alpha (TNF-α) السيتوكين الرئيسي الملازم للالتهاب، ويمكن أن يعمل كمحرض داخلي لأنماط متعددة من ضمنها سرطان الثدي.
كان هدف دراستنا تقييم دور تراكيز عامِلُ نَخَرِ الوَرَم TNF-α المصلية لدى مريضات سرطان ثدي سوريات وتقييم ارتباطها مع تطور الورم. وأُجريت الدراسة الحالية على 24 مريضة سرطان ثدي، ومجموعتي شواهد تكونتا من: 12 مريضة مصابة بمرض ثدي حميد، و12 من الشواهد الإناث الصحيحات المتوافقات بالعمر مع المجموعة السابقة. جرى قياس تراكيز TNF-α المصلية بطريقة مقايسة الممتز المناعي المرتبط بالإنزيم (ELISA) Enzyme Linked Immunosorbent Assay.
لاحظنا أن تراكيز TNF-α المصلية لدى مجموعة مريضات سرطان الثدي كانت مرتفعة بشكل يُعتد به (P<0.001) بالمقارنة مع مجموعة مريضات ورم الثدي الحميد ومجموعة الشواهد الصحيحات، كما كانت مرتبطة مع بشكل يُعتد به مع مرحلة تقدم الورم، والغزو، والأورام الأكبر حجماً والأورام قليلة التمايز، والتعبير القليل عن مستقبلات الاستروجين والبروجستيرون وأكثر من 3 عقد لمفية إيجابية. استنتجنا أن TNF-α يمكن أن يكون له دور في سرطان الثدي وبمكن استخدام اختبار TNF-α كواصم ورمي مفيد في تشخيص وتطور مرض سرطان الثدي والتنبؤ بنتيجته.
|
| Tumor necrosis factor alpha (TNF-α) is the main pro inflammatory cytokine, and can act as endogenous promoter of cancer in many cancer types including breast cancer.
The aim of our study was Evaluating role of serum TNF-α concentrations in Syrian breast cancer patients, and evaluating its correlation with tumor development. The current study was carried out on 24 breast cancer female patients, controls consisted of two groups: 12 benign breast disease female patients and 12 age matched healthy female controls. Serum TNF-α concentrations were measured using an enzyme-linked immune sorbent assay.
We observed that Serum TNF-alpha concentrations were significantly increased in breast cancer patients compared to benign breast disease patients and healthy controls (p<0.001), and were significantly associated with advanced-stage, invasive, larger and poorly differentiated tumors, estrogen and progesterone receptors low expression and >3 positive lymph nodes. We concluded that TNF-α may have a role in breast cancer, and serum TNF-α test could be used as a useful tumor marker for diagnosis, disease development and outcome of breast cancer.
|
| المقدمة Introduction |
| يُعد سرطان الثدي مشكلة صحية هامة على مستوى العالم، فهو أكثر السرطانات شيوعاً لدى النساء، حيث بلغت نسبة حالات سرطان الثدي 25.2% من مجموع حالات السرطان الجديدة لدى النساء عام 2012، كما يشكل سرطان الثدي السبب الرئيسي للوفيات المتعلقة بالسرطان لدى النساء (1).
تملك السيتوكينات Cytokines تأثيرات متضاربة في إمراضية سرطان الثدي وبشكل يعتمد على فترة التعرض للسيتوكين وتركيزه في البيئة الورمية الصغرية tumor microenvironment، وتستخدم بعض السيتوكينات في الأبحاث المتعلقة بمرض السرطان كواصم يرتبط مع الأعراض ونتائج المرض (2).
يعد عامل نخر للورم ألفا TNF-α السيتوكين الرئيسي في المناعة والالتهاب، وعلى الرغم من تسميته هذه، وتاريخ اكتشافه، والترخيص باستخدامه كدواء مضاد للسرطان (3)، إلا أن الدراسات أظهرت تورطه في تطور مرض السرطان وترقيه ، حيث وجد أن له تأثيراً سابقاً للورم pro-cancerous، ومسبباً للتسرطن carcinogenesis في نماذج جلد الفأر (4).
لا يمكن التقاط TNF-α في مصل الأشخاص الأصحاء ، لكنه وجد في مصل مرضى السرطان، وهو يرتبط مع تقدم المرض والإنذار السيء وحدوث القهم (5).
أظهرت الدراسات ارتفاع تراكيز TNF-α المصلية في أمراض الثدي الحميدة والسرطانية، وارتفاعها بالارتباط مع مرحلة الورم، مما يشير إلى أنه قد يلعب دوراً تشخيصياً وتنبؤياً وأنه يعبر عن شدة المرحلة في الورم الغازي (6).
تهدف دراستنا إلى تقييم مستويات العامل TNF-α المصلية لدى مريضات سرطان الثدي السوريات ومقارنتها مع مجموعة شاهدة سليمة، ومجموعة مريضات أورام حميدة. كما تهدف دراستنا إلى تقييم ارتباط هذه المستويات مع تطور الورم وتقدمه من خلال ربطها بالخصائص السريرية الامراضية مثل حجم الورم وتشكل النقائل.
|
| المواد والطرقMaterials and Methods |
تمت المصادقة على البحث من قبل لجنة أخلاقيات البحث العلمي في جامعة دمشق. وجرى ملء الموافقة المستنيرة Informed consent من كل المشاركات في البحث.
شملت دراستنا 48 مشاركة، وجرى تقسيم المشاركات إلى ثلاثة مجموعات:
مجموعـة مريضات سرطان الثدي: ضمت 24 مريضة سرطان ثدي، استناداً إلى نتائج التشريح المرضي والتصوير الشعاعي، تراوحت أعمارهن بين 30 و77 عاماً، بمتوسط حسابي 50 وانحراف معياري 11.
المجموعة الشاهدة الأولى: مجموعة الأورام الحميدة ضمت 12 مريضة ورم غدي ليفي .fibroadenoma
المجموعة الشاهدة الثانية: المجموعة الشاهدة السليمة، ضمت 12 امرأة سليمة، تتراوح أعمارهن بين 30 و69 عاماً، بمتوسط حسابي 48 وانحراف معياري 14.
جرى ملء استبيان الدراسة، وأخذت كافة المعلومات السريرية المتعلقة بالمريضة من اضبارتها، ونتائج التصوير والتشريح المرضي، وحالة مستقبلات الاستروجين والبروجسترون في حال أمكن ذلك (لم تتضمن اضبارات ستة 6 مريضات حالة المستقبلات).
جرى تقييم المريضات فور تشخيص الإصابة وقبل خضوعهن لأي علاج جراحي أو شعاعي أو كيميائي، لتجنب تأثير العلاج على المستويات المصلية للعامل المدروس.
الاعتيان
جُمعت العينات المرضية من شعب الجراحة العامة في المستشفيات التالية في دمشق: الأسد الجامعي، المواساة الجامعي، والمجتهد، حيث بُزل 5 مل من الدم الوريدي من كل مشاركة في الدراسة ضمن أنبوب جاف عقيم، تم فصل المصل بالتنبيذ وبسرعة 3000 دورة/ دقيقة لمدة 10 دقائق، ثم حفظ المصل في درجة حرارة – 80 C° إلى حين إجراء المعايرة.
|
| مقايسة مستويات TNF-α المصلية |
| عُينت مستويات TNF-α المصلية بطريقة مقايسة الممتز المناعي المرتبطة بالإنزيم (ELISA) Enzyme Linked Immunosorbent Assay باستخدام عتيدة KAP1751 TNF-αEASIA من شركة DIA Source البلجيكية، بإجراء المقايسة تبعاً لتعليمات الشركة المصنعة، ثم قراءة الصفيحة في موجة طولها450 nm ، من خلال قياس الامتصاص للون الناتج والذي يتناسب مع كمية TNF-α الموجودة.
جرى رسم منحنى المعايرة، وتحديد تراكيز TNF-α مقدرة بـ pg/ml في العينات من خلال إدراجها على المنحنى.
|
| التحليل الإحصائي Statistical Analysis |
| أجري التحليل الإحصائي باستخدام برنامج الحزمة الإحصائية(version21, IBM SPSS) Statistical Package for Social Sciences.
جرى التعبير عن مستويات TNF-α المصلية باستخدام المتوسط الحسابي±الانحراف المعياري mean±Standard Deviation.
جرى اختبار توزع المتثابتات باستخدام اختبار Semirnov-Kolmogorov test.
كما جرت المقارنة بين مجموعات الدراسة للمتثابتات التي تتوزع توزعاً طبيعياً باستخدام اختبار t-test للمجموعتين المستقلتين، واختبار تحليل التباين (Analysis of variance) أو ANOVA لثلاث مجموعات أو أكثر واتباعه باختبار (LSD) Least Significant Difference لمقارنة الفروقات بين المجموعات مثنى مثنى.
اعتمدت القيمة P<0.05 كونها تدل على قيمة إحصائية يُعتد بها.
|
| النتائج Results |
حُسب متوسط تراكيز TNF-α المصلية لدى مجموعة مريضات سرطان الثدي، وقورن مع المجموعة الشاهدة السليمة، ومجموعة مريضات الأورام الحميدة.
كان متوسط تراكيز العامل TNF-α المصلية لدى مجموعة المريضات 4.52±10.97 pg/ml، وهو أعلى من المجموعة الشاهدة السليمة 2.9±4.45 pg/ml، وأعلى من المجموعة الشاهدة الثانية ذات الأورام الحميدة 70.7±2.27 pg/ml، والفارق يُعتد به إحصائياً (P =0.000) (الشكل 1).
أظهرت دراستنا وجود علاقة بين تراكيز TNF-α المصلية وتطور وإنذاره، وذلك من خلال مقارنة تراكيز TNF-α المصلية مقدرة بـ pg /ml بين مجموعات مريضات سرطان الثدي وفق الخصائص السريرية الإمراضية للورم clinicopathologic proprieties، مثل حجم الورم وحالة العقد اللمفيّة الإبطيّة وتشكل النقائل وحالة المستقبلات الهرمونية، ودرجة الورم tumor grade التي تُعبر عن درجة التشابه بين الخلايا السّرطانيّة وأنسجة الثّدي الطبيعِيّة ومرحلة الورم tumor stage، وفقاً لنظام تصنيف الورم والعقد والنّقائل TNM والذي يعتمد على حجم الورم (T)، حالة العقد (N)، ووجود نقائل بعيدة (M)، ويظهر هذا في الجدول 1 الذي يبين أن متوسط تراكيز TNF-α المصلية لدى مجموعة المريضات مرتبطة مع مرحلة الورم، حيث كان متوسط تراكيز TNF-α المصلية لدى مجموعة مريضات الورم من المرحلة V? (4.62±15.76 pg/ml) أعلى من مجموعة مريضات الورم من المرحلة II? (2.85±11.50 pg/ml)، وأعلى من مجموعة مريضات المرحلة II (2.11±9.37 pg/ml)، وأعلى من مجموعة مريضات الأورام من المرحلة ? (1.49±6.88 pg/ml)، وكان الفارق معتداً به إحصائياً (P<0.0001) كما هو واضح في الشكل 2.
|
 |
وبالمقارنة بين مريضات الأورام حسب تشكيل النقائل، كان متوسط تراكيز TNF-α المصلية لدى مجموعة مريضات الورم المنتشر (4.61±15.76 pg/ml) أعلى من مجموعة مريضات الورم غير المنتشر (2.68±8.99 pg/ml)، والفارق هام إحصائياً (p<0.0001) (الشكل 3).
وجد أن متوسط تراكيز TNF-α المصلية لدى مجموعة المريضات مرتبط مع درجة الورم، حيث كان متوسط تراكيز TNF-α المصلية لدى مجموعة مريضات الأورام من الدرجة 3 (5.28±14.57 pg/ml) أعلى من مجموعة مريضات الأورام من الدرجة 2 (2.18±11.18 pg/ml)، وأعلى من مجموعة مريضات الأورام من الدرجة 1 (2.22±7.58 pg/ml) (0.002=p).
كما وجد أن متوسط تراكيز TNF-α المصلية لدى مجموعة المريضات مرتبط مع حجم الورم، حيث
كان متوسط تراكيز TNF-α المصلية لدى مجموعة مريضات الأورام التي قياسها يساوي أو أكبر من 5 cm (13.854.88± pg/ml) أعلى من مجموعة مريضات الأورام التي قياسها أصغر من cm 5 (3.68±9.52 pg/ml)، والفارق هام إحصائياً (0.023 =p).
وجد بالمقارنة حسب إصابة العقد اللمفية أن متوسط تراكيز TNF-α المصلية لدى مجموعة مريضات الأورام التي تترافق مع إصابة أكثر من 3 عقد لمفية أعلى (4.57±14.51 pg/ml) من مجموعة مريضات الأورام التي تترافق مع إصابة 3 عقد لمفية أو أقل (8.43pg/ml 2.26±)، والفارق معتد به إحصائياً (p<0.0001).
وجد بالمقارنة حسب حالة مستقبلات الإستروجين أن متوسط تراكيز TNF-α المصلية لدى مجموعة مريضات الأورام سلبية المستقبلات أعلى (5.38±14.74 pg/ml) من مجموعة مريضات الأورام إيجابية المستقبلات (2.66±9.83 pg/ml)، والفارق يعتد به إحصائياً (=P 0.022).
ووجد بالنظر إلى حالة مستقبلات البروجستيرون
أن متوسط تراكيز TNF-α المصلية لدى مجموعة مريضات الأورام سلبية المستقبلات أعلى (±12.955.45 pg/ml) من مجموعة مريضات الأورام إيجابية المستقبلات (1.74±8.28 pg/ml)، والفارق معتد به إحصائياً (=p 0.045).
|
 |
| |
الاستنتاج Conclusion
تراكيز TNF-α المصلية مرتفعة لدى مجموعة مريضات سرطان الثدي وترتبط مع نمو الورم وتطوره، مما يشير إلى قيمته التنبؤية في سير المرض وإنذاره.
|
| المراجع References |
1-International Agency for Research on Cancer and Cancer Research U K. World Cancer Factsheet.
Cancer Research U K, London, 2008, 2014.
2-Al-Hassan A.A; Muhymen N.A; Ghany Hussien A; Mustafa L.K. and Al-Obeidy E.S.
Possible Role of IL-1-? and TNF-α in Breast Cancer.
Iraqi J Med Sci, 8, 1, 11-17, 2010.
3-Van Horssen R; Hagen T.L.M. and Eggermont A.M.M.
TNF-α in Cancer Treatment: Molecular Insights, Antitumor Effects, and Clinical Utility.
Oncologist, 11, 397-408, 2006.
4-Mocellin S; Rossi C.R; Pilati P. and Nitti D.
Tumor necrosis factor, cancer and anticancer therapy.
Cytokine Growth Factor Rev, 16, 1, 35-53, 2005.
5-Szlosarek P; Charles K.A. and Balkwill F.R.
Tumour necrosis factor-a as a tumour promoter.
Eur. J. Cancer, 42, 745-750, 2006.
6-Garc?a-Tu??n I; Ricote M; Ruiz A; Fraile B; Paniagua R. and Royuela M.
Role of tumor necrosis factor-? and its receptors in human benign breast lesions and tumors in situ and infiltrative.
Cancer Sci, 97, 10, 1044-1049, 2006.
7-Lu H; Ouyang W. and Huang C.
Inflammation, a Key Event in Cancer Development.
Mol Cancer Res, 4, 4, 221-233, 2006.
8-Balkwill F.
TNF-α in promotion and progression of cancer.
Cancer Metastasis Rev; 25, 3, 409-416, 2006.
9-Alokail M.S. et al.
Metabolic syndrome biomarkers and early breast cancer in Saudi women evidence for the presence of a systemic stress response and or a pre-existing metabolic syndrome-related neoplasia risk.
BMC Cancer, 13, 49, 2013.
10-Berberoglu U. and Yildirim E.
Serum levels of tumor necrosis factor alpha correlate with response to neoadjuvant chemotherapy in locally advanced breast cancer.
Int J Biol Markers, 19, 2, 130-4, 2004.
11-Jab?onska E; Iluk M.K; Markiewicz W; Piotrowski L; Grabowska Z. and Jab?onski J.
TNF-α, IL-6 and Their Soluble Receptor Serum Levels and Secretion by Neutrophils in Cancer Patients.
Arch. Immunol. Ther. Exp. Warsz, 49, 1, 63-69, 2001.
12-Alsuhail R.
Serum Level of Interleukin 6 & Tumor Necrosis Factor in Iraqi Breast Cancer patients.
MMJ, 7, 34-7, 2008.
13-Papadopoulou E. et al.
Significance of serum tumor necrosis factor-alpha and its combination with HER-2 codon 655 polymorphism in the diagnosis and prognosis of breast cancer.
Int J Biol Markers, 25, 3, 126-35, 2010.
14-Mohammed E.S; Al-Taie W.F; Numan I.T. and Hussain S.A.
Changes in Serum Levels of Tumor Necrosis Factor-Alpha and Antioxidant status in Different Stages of Malignant Prostate Cancer Patients in Iraq.
Iraqi J Pharm Sci, 21, 1, 56-60, 2012.
15-Waterston A. and Bower M.
TNF and cancer: good or bad?
Cancer Ther; 2, 131-148, 2004.
16-Hasan W.M. and Saleh J.S.
Association between TNF-α, Nutritional status and Quality of Life in Syrian Patients with Cancer.
Int. J. Pharm. Sci. Rev. Res., 29, 1, 216-220, 2014.
|
| |
| |
| |
| |
| |
| المجلد 8 , العدد 3-4 , ربيع الثاني 1438 - كانون الثاني (يناير) 2017 |
|
|
|
